[發明專利]一種創制梨100%自花結實性種質的方法

無效

• 申請號: 201010256234.4
• 申請日: 2010-08-18
• 公開（公告）號: CN101982063A
• 公開（公告）日: 2011-03-02
• 發明（設計）人: 張紹鈴;齊永杰;吳俊;吳華清;陶書田;齊開杰
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;C12Q1/68
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

一、技術領域

本發明提供了一種創制梨100％自花結實性種質的方法，屬于遺傳育種學領域，建立了簡捷、快速創制梨自花結實性種質的技術體系，在果樹自花結實性品種(株系)的選育中有著重要的推廣價值。?

二、背景技術

梨是我國乃至世界主要水果之一，我國現有栽培面積125.84萬公頃，是我國的第三大水果。梨是典型的配子體型自交不親和性果樹，也就是說梨絕大多數品種自花授粉不結實性，在生產中必須合理配置授粉樹或進行人工輔助授粉，才有可能獲得應有的產量，也常常因授粉樹配置不當、花期不良氣象條件影響昆蟲傳粉或人工授粉不及時等原因造成減產，尤其是近年來地球氣候變化激烈，春季倒春寒以及花期低溫陰雨天氣影響昆蟲的傳粉活動，使得許多梨樹授粉受精不良，坐果率低下，嚴重影響產量。如果所栽培的梨品種自花授粉能結實的話，就能避免或減少因傳粉媒介昆蟲的不活動而造成授粉受精不良、坐果率低下、產量受損的問題，尤其是對于保護地栽培的果樹來說更為重要。因此，創新梨自花結實性種質，選育出梨自花結實性(自交親和性)品種是個亟待解決的問題，也是今后梨、蘋果等自花授粉不結實性果樹新品種選育的目標之一。鑒于此，各國的梨育種學家已經把培育自花結實性品種作為育種目標，但是進展比較緩慢。‘奧嗄二十世紀’?為自花結實性梨品種，其雌蕊?基因發生變異，導致雌蕊自交不親和性功能喪失，花粉自交不親和性功能正常，因而是培育自花結實性后代的理想材料。日本已經利用‘奧嗄二十世紀’作親本，培育出自花結實性優良品種‘秋榮’?早期以‘奧嗄二十世紀’?和‘秋榮’?為親本培育自花結實性種質，雜交后代中既有自花結實性株系，又有自花不結實性株系，需經過篩選，只有攜帶?基因的株系(?a≠4)才表現為自花結實。?

正是由于自花結實性品種在栽培上有著良好的應用前景，所以尋找一種快速、準確創制梨自花結實性后代株系(品種等)的方法顯得尤為重要。本發明提供了一種創制梨100％自花結實性種質的方法，利用‘奧嗄二十世紀’自交后代純合體株系‘54S-135’?作父本，另一個品種(S_aS_b，a、b≠4)為母本進行雜交授粉，根據基因的分離規律，在其雜交后代中均攜帶自花結實性基因?故無需篩選，只要能得到?后代株系即為自花結實性種質。本技術體系簡便快捷，為自花結實性優良梨品種的選育節約了育種成本，縮短了育種進程。該理論體系還可借鑒應用于其他作物自花結實種質的創制，因此有著廣返的應用價值和推廣前景。?

三、發明內容

技術問題?

本發明的目的是：提供了一種創制梨100％自花結實性種質的方法。利用‘奧嗄二十世紀’自交后代純合體株系‘54S-135’?作父本，另一個品種(S_aS_b，a、b≠4)為母本，進行雜交授粉，得到后代株系即為自花結實性種質。?

技術方案?

創制梨100％自花結實性種質的方法，其特征在于：?

1)田間授粉實驗：以基因型為S₂S₄^sm的‘奧嗄二十世紀’自交后代S基因純合體?株系‘54S-135’為父本，春季采集其大蕾期花苞的花藥，室內25℃干燥條件下散出的花粉，于開花前1天選用另一個基因型為S_aS_b，a、b≠4品種為母本，對擬授粉的花蕾去雄后，人工授予‘54S-135’花粉，每個組合授粉200朵左右的花序，再套上硫酸紙袋，授粉后25天調查花序和花朵坐果率，每花序留1～2個果，種子成熟后采果并取出種子，沙藏育苗；?

2)?基因的鑒證：用梨自花結實性?基因特異正反向引物?

S₄^smF：5′-TCGTCTTAGGGATTTCCAATGC-3′?

S₄^smR：5′-GCCTTAAGGGTTCATTGGGC-3′?

擴增雜交后代各株系的基因組DNA，若能擴增出一條666bp的片段，則標記著該植株中含有?基因的存在，由于后代中各植株中均攜帶自花結實性基因S₄^sm-RNase，故所得后代均為自花結實性株系。?

有益效果?

本發明所提供的一種創制梨100％自花結實性種質的方法，具有以下優點：?