[發明專利]N-乙酰高絲氨酸內酯酶-木聚糖酶融合蛋白及其編碼基因和應用

有效

• 申請號: 201010251451.4
• 申請日: 2010-08-11
• 公開（公告）號: CN101948818A
• 公開（公告）日: 2011-01-19
• 發明（設計）人: 周志剛;張美超;姚斌;曹雅男;何夙旭;劉玉春;孟昆;楊培龍
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院飼料研究所
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;A23K1/165;C12R1/84
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及一種N-乙酰高絲氨酸內酯酶-木聚糖酶融合蛋白及其編碼基因和應用。

背景技術

N-乙酰高絲氨酸內酯(N-acyl?homoserine?lactones，AHLs)是一類廣泛存在于革蘭氏陰性細菌中，調控群體感應(quorum-sensing)系統中的信號分子。這些信號分子是由病原菌本身產生，可自由穿透細菌的細胞壁和細胞膜同時參與許多病原菌致病基因的表達調控，當分子濃度達到一定閾值時，就可啟動病原菌致病基因的表達。蘇云金芽胞桿菌(Bacillus?thuringiensis)不同亞種中廣泛存在著對AHLs分子有降解作用的非分泌性蛋白N-乙酰高絲氨酸內酯酶(AiiA)，這類蛋白通過水解進入胞內的AHLs分子的內酯鍵，降低其濃度，使致病基因不能表達，從而阻止了病原菌對生物的侵染，是一類群體感應淬滅酶。

內切-1，4-β-D-木聚糖酶，簡稱木聚糖酶，能夠隨機的切割木聚糖主鏈骨架的β-1，4-糖苷鍵，其水解產物主要是木二糖和木寡糖，以及少量的木糖和阿拉伯糖。木聚糖酶作為環保型飼料添加劑廣泛應用于畜牧業，具有改善畜禽消化道功能，降低食糜粘度和抗營養性，提高飼料利用率和減少環境污染等特點。

發明內容

本發明的目的是提供一種N-乙酰高絲氨酸內酯酶-木聚糖酶融合蛋白及其編碼基因和應用。

本發明提供的蛋白質，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

(b)將序列1的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且同時具有N-乙酰高絲氨酸內酯酶與木聚糖酶活性的由序列1衍生的蛋白質。

為了使(a)中的蛋白質便于純化，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標簽。

表1標簽的序列

??標簽??殘基??序列??Poly-Arg??5-6(通常為5個)??RRRRR??Poly-His??2-10(通常為6個)??HHHHHH

??FLAG??8??DYKDDDDK??Strep-tag?II??8??WSHPQFEK??c-myc??10??EQKLISEEDL