[發明專利]一種新的海洋疣孢菌菌株及其應用

無效

• 申請號: 201010242600.0
• 申請日: 2010-08-02
• 公開（公告）號: CN101921721A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發明（設計）人: 江紅;聶毅磊;林如;連云陽;鄭衛
• 申請（專利權）人: 福建省微生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/02;C07C69/614;C07C67/48;A61P35/00;C12R1/01
• 代理公司: 福州市鼓樓區京華專利事務所(普通合伙) 35212
• 代理人: 翁素華

1.一種新的海洋疣孢菌菌株，其特征在于：所述海洋疣孢菌菌株為疣孢菌FIM06031(Verrucosispora?sp.FIM06031)，于2010年6月12日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?NO.3924。

2.一種抑制腫瘤的萜類化合物FW03104，其特征在于：所述萜類化合物FW03104是通過分離提取疣孢菌FIM06031的發酵液獲得的，該萜類化合物FW03104的化學結構式為：

3.如權利要求2所述抑制腫瘤的萜類化合物FW03104，其特征在于：其具有下述物理化學性狀：

(1)顏色和外觀：白色無定形粉末；

(2)分子式：C₂₃H₃₂O₃；

(3)高分辨電噴霧質譜(HR-ESI-MS)

測量值：m/z?379.2249[M+Na]⁺

理論值：m/z?379.2351[M+Na]⁺；

(4)¹H核磁共振波譜(MEOD，400MHz)

δ(ppm)：4.54(dd)，1.03，1.79，1.41，1.76，1.92(m)，1.49，1.94，1.11，1.84，1.75(s)，4.71(d)，0.94(s)，1.15(s)，3.38(s)，7.36，7.31，7.50；

(5)¹³C核磁共振波譜(MEOD，400MHz)

δ(ppm)：83.0，41.7，72.0，54.1，26.2，26.8，27.6，47.2，41.4，39.5，151.6，21.5，108.9，14.5，22.5，173.3，49.9，135.9，130.4，129.6，128.1；

(6)溶解度：溶于甲醇，丙酮，乙腈，乙酸乙酯和二甲亞砜；微溶于正己烷和石油醚；不溶于水。

4.如權利要求2所述抑制腫瘤的萜類化合物FW03104，其特征在于：其制備方法的具體步驟為：

(1)制備疣孢菌FIM06031的發酵液：首先將一鉑環疣孢菌FIM06031淀粉天冬素瓊脂斜面培養物接入種子培養基，溫度35℃，轉速240rpm/min，培養時間45h，然后按10％移種量轉入發酵培養基，溫度28℃，轉速240rpm/min，振蕩培養96～120h；

(2)提取：將經步驟(1)培養所得的疣孢菌FIM06031菌株發酵液通過4500rpm離心15min后，把獲得的菌絲渣用2倍體積的95％乙醇浸泡2次，浸泡液減壓濃縮，濃縮液用等量體積的乙酸乙酯萃取3次，減壓濃縮，得浸膏狀提取物；

(3)分離：將步驟(2)獲得的提取物采用正相硅膠柱層析，以環己烷∶丙酮溶劑梯度洗脫，薄層層析檢測，收集含萜類化合物FW03104的流份；再經C₁₈反相柱層析，以甲醇∶水梯度洗脫，薄層層析檢測，收集含萜類化合物FW03104的流份；再經Sephadex?LH-20凝膠柱層析，以丙酮洗脫，薄層層析檢測，收集含萜類化合物FW03104的流份；再經正相硅膠柱層析，以氯仿∶甲醇溶劑梯度洗脫，薄層層析檢測，得到對腫瘤細胞具有細胞毒活性的萜類化合物FW03104純品。

5.如權利要求4所述抑制腫瘤的萜類化合物FW03104，其特征在于：

所述種子培養基的組分為：可溶性淀粉1.5％，葡萄糖0.5％，蛋白胨0.5％，酵母粉0.5％，MgSO₄·7H₂O?0.05％，NaCl?0.05％，(NH₄)₂SO₄0.05％，CaCO₃0.1％，50％陳海水配制，pH?7.5；

發酵培養基的組分為：可溶性淀粉4％，葡萄糖0.5％，黃豆餅粉2.5％，酵母粉0.5％，MgSO₄·7H₂O?0.05％，K₂HPO₄?0.05％，CaCO₃?0.1％，50％陳海水配制，pH?7.8。