[發明專利]輔助鑒別具有不同產奶性狀的奶牛的方法及其專用引物對

有效

• 申請號: 201010242552.5
• 申請日: 2010-07-30
• 公開（公告）號: CN101921849A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發明（設計）人: 張沅;何陽花;俞英;王雅春;孫東曉;張毅
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;A01K67/02
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及分子生物學和抗病育種學領域，特別涉及一種輔助鑒別具有不同產奶性狀的奶牛的方法及其專用引物對。

背景技術

傳統的以數量遺傳學理論為基礎的選擇方法在指導牛育種中獲得了成功，但傳統的育種方法周期長，對一些低遺傳力性狀、限性性狀、抗性性狀和不能活體測定的性狀改良效果甚微。九十年代以來，隨著分子生物學技術的進步以及在家畜領域中的應用，逐步出現了以分子標記為核心的分子標記輔助選擇(Marker?Assisted?Selection，MAS)和滲入等分子育種技術。分子標記的應用，為直接對基因型進行選擇提供了可能。如果標記本身就是引起性狀變異的因素，或者標記與目標基因緊密連鎖，通過對標記基因型的選擇，都可以實現對目標性狀的選擇，加速育種進程。能夠應用于分子標記輔助選擇的QTL、基因或標記必須對目標性狀具有較大的遺傳貢獻率，即主效QTL或基因，因此尋找這些主效QTL、基因和與之緊密連鎖的分子標記成為分子標記輔助選擇的前提和基礎，也是當前和今后一段時間家畜分子生物學領域的研究重點。

奶牛產奶性狀和一些重要功能性狀，除了受多基因控制外，還受環境的影響。功能性狀是指那些不是通過增加產品數量，而是通過降低生產投入來提高生產效率的一類性狀。通常這類性狀包括健康性狀、繁殖力性狀、長壽性、飼料利用率及工作能力性狀。功能性狀的QTL研究是從上個世紀90年代中期才開始陸續進行。并且研究較多的主要是乳房炎和繁殖力性狀。Klungland?et?al.(2001)直接對奶牛乳房炎進行了分析，對于乳房炎的研究都是基于對體細胞評分相關QTL定位的研究。除了6，9，17，25，28號染色體上沒有檢測到與SCS相關QTLs外，其他24條常染色體上均檢測到了相關的QTLs(http://www.vetsci.usyd.edu.au/reprogen/QTL_Map)。而且在5號染色體上，檢測到了4個與SCS相關的QTLs，在19號染色體上只檢測到了2個SCS相關的QTLs。

信號傳導與轉錄激活因子(signal?transducer?and?activator?of?transcription，STAT)是一族DNA結合蛋白，與酪氨酸磷酸化信號通路偶聯，發揮轉錄調控作用，從而介導多種生物學效應。哺乳類STAT基因定位表明其進化可能與其功能有關。STAT1-STAT4、STAT2-STAT6、STAT3-STAT5a/STAT5b分別在染色體上緊密連鎖，說明它們可能分別由共同的原始基因進化而來，具有相似的生物學功能。

STAT蛋白在細胞因子誘導的細胞的增殖、分化過程中毫無置疑發揮著重要的生物學功能。然而，由于由激活的STAT蛋白所誘導的大多數基因仍是未知數，再者，已知30種以上的配體可激活7種已知STAT蛋白中的一個或更多個，必然有一些STAT蛋白本身以外的因素調節受體反應的特異性，因此，STAT蛋白的詳細生物學功能仍不十分清楚。用缺乏STAT1蛋白的小鼠進行研究顯示，STAT1蛋白獨特的、非特異性的功能在于調節一系列基因的表達，這些基因共同維持小鼠的先天免疫。STAT4和STAT6在獲得性免疫方面起著非常重要的作用。STAT6介導白細胞介素4(IL-4)誘導的主要組織相容性復合物(MHC)類抗原、多種免疫球蛋白受體和細胞表面蛋白表達上調。STAT3被許多種細胞因子激活后，誘導多種基因的表達。這些基因的表達量在組織損傷和炎癥時明顯增高(急性期應答基因)。在應答中，STAT3作為一耦合器，把JAK-STAT信號通路與其它通路連在一起。STAT3在IL-6和白血病抑制因子(LIF)誘導的M1白血病細胞的生長阻滯和終末分化中發揮重要作用。STAT5在乳腺組織對催乳素的應答中調節乳蛋白基因的表達。STAT5a蛋白也可以被認為是一種乳腺因子，起初在乳腺中被發現作為乳蛋白基因表達的調控者；而且STAT5a蛋白也是干擾素-τ(IFN-τ)和胎盤催乳素(PL)信號通路的一員。它參與各種細胞的信號轉導，包括子宮和乳腺上皮細胞。子宮除了受IFN-τ和PL作用外，還受許多其他激素的作用，包括雌激素、孕酮和胎盤生長激素等。催乳素刺激STAT5a/b同型二聚體結合來誘導牛的子宮乳蛋白(UTMP)基因及骨橋蛋白(OPN)基因的轉錄。