[發(fā)明專利]鐵皮石斛自然光快繁育苗方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010242332.2
• 申請日: 2010-07-29
• 公開（公告）號: CN102119655A
• 公開（公告）日: 2011-07-13
• 發(fā)明（設計）人: 張世定;邊云哲
• 申請（專利權）人: 云南紅土生源藥用生物科技開發(fā)有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明屬于生物技術領域，尤其涉及一種珍稀瀕危中藥材鐵皮石斛自然光快繁育苗的方法。

背景技術

鐵皮石斛是《中國藥典》收載的主要品種之一，藥用價值高、保健功能強，主要成分為多糖、石斛堿、氨基酸和微量元素等，具有滋陰清熱、益胃生津、清嗓明目、增強人體免疫力、抗衰老、抗腫瘤等功效。多年來，由于產區(qū)藥農毀滅性采挖，使野生鐵皮石斛資源瀕臨滅絕，國家已將鐵皮石斛列為重點保護的珍稀瀕危物種，并鼓勵人工大面積栽培鐵皮石斛，變野生為家種，以保障鐵皮石斛資源的可持續(xù)性利用和發(fā)展。

本發(fā)明運用現(xiàn)代生物組培繁育技術，大膽突破傳統(tǒng)利用日光燈管提供光照培養(yǎng)苗的方法，在國內首家采用自然光快繁育苗，通過合理配置遮陽系統(tǒng)，提供更為適宜的光照度來培養(yǎng)苗，取得了良好成效。一顆鐵皮石斛蒴果通過5～6月的組培培養(yǎng)可快繁培育出12萬株以上石斛組培苗，煉苗移栽成活率達到98％以上。而目前國內很多科研單位和公司均采用日光燈管提供光照來培育苗，比如“一種鐵皮石斛快繁的組培方法”(申請?zhí)枺?008101108704.5)、“一種鐵皮石斛莖尖組培快速繁殖的育苗方法”(申請?zhí)枺?00710066480.1)、“一種應用鐵皮石斛激素自養(yǎng)型莖尖培養(yǎng)生產藥材的方法”(申請?zhí)枺?2136925.9)、“一種鐵皮石斛的培育方法”(申請?zhí)枺?00410017380.6)等，不但浪費消耗了能源，增加了組培生產成本，而且培養(yǎng)出的苗，明顯光照不夠，植株較弱。

本發(fā)明的目的在于利用現(xiàn)代生物技術，充分利用自然光來培養(yǎng)苗，提高了鐵皮石斛種苗的擴繁速度和生產量，節(jié)約了能源，降低了組培生產成本，提高了組培苗的煉苗移栽成活率，對瀕危緊缺藥用植物資源再生和持續(xù)利用具有十分積極的影響。

發(fā)明內容

為了實現(xiàn)這一目的，發(fā)明人經過試驗，成功完成了可用于鐵皮石斛種苗組培生產中不同階段的自然光照度和培養(yǎng)基配方的控制使用，對自然光遮蔭度和培養(yǎng)基配方進行了試驗和完善，特別是對不同階段組培苗的適宜光照控制進行了多次研究和試驗，獲得了獨創(chuàng)的培養(yǎng)方法，取得了良好效果，解決了鐵皮石斛組培苗生產過程中能耗高、苗嫩弱的問題，完成了鐵皮石斛自然光快繁育苗生產技術的發(fā)明研究。

鐵皮石斛自然光快繁育苗方法分為三個階段：

1、將成熟的鐵皮蒴果或儲存的種子經過消毒處理程序，播入1/2MS基本培養(yǎng)基+土豆汁15％(V/V)+瓊脂5g/L的培養(yǎng)基里，進行種子萌發(fā)培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度22～25℃。通過雙層遮陽控制系統(tǒng)，光照度控制在800～1500lx，每日光照10～12小時，約15～20天種胚膨大、萌發(fā)形成綠色的原球莖；

2、將原球莖轉入MS基本培養(yǎng)基+BA(6-芐基腺嘌呤)0.01～0.5mg/L+NAA(α-萘乙酸)0.01～0.5mg/L+土豆汁20％(V/V)+瓊脂5g/L的培養(yǎng)基里進行原球莖增殖、分化培養(yǎng)。通過雙層遮陽控制系統(tǒng)，光照度控制在1500～2500lx，每日光照10～12小時，約1～1.5月可觀察到瓶內原球莖重疊堆積在培養(yǎng)基中，并有葉原莖和小苗出現(xiàn)，小苗高度1～2cm。將小苗轉入同樣的培養(yǎng)基和同樣的光照條件，繼續(xù)培養(yǎng)1.5月，將小苗培養(yǎng)成中苗，苗高3～4cm左右；

3、將中苗轉入MS基本培養(yǎng)基+NAA(α-萘乙酸)0.01～0.5mg/L+香蕉汁15％(V/V)+土豆汁10％(V/V)+瓊脂6g/L的壯苗培養(yǎng)基。通過雙層遮陽控制系統(tǒng)，光照度控制在2000～4000lx，每日光照10～12小時，約1.5個月可培養(yǎng)出5cm高以上的大苗，大苗可出瓶煉苗、移栽。

上述的鐵皮石斛自然光快繁育苗方法中，所提到的對于鐵皮石斛各生長過程光照度控制和培養(yǎng)基的配方是：(1)種胚誘導：提供800～1500lx的弱光和1/2MS基本培養(yǎng)基+土豆汁15％(V/V)+瓊脂5g/L的培養(yǎng)基(2)原球莖增殖與分化：提供1500～2500lx的較強光和MS基本培養(yǎng)基+BA(6-芐基腺嘌呤)0.01～0.5mg/L+NAA(α-萘乙酸)0.01～0.5mg/L+土豆汁20％(V/V)+瓊脂5g/L的培養(yǎng)基(3)壯苗生根：提供2000～4000lx的強光和MS基本培養(yǎng)基+NAA(α-萘乙酸)0.01～0.5mg/L+香蕉汁15％(V/V)+土豆汁10％(V/V)+瓊脂6g/L的培養(yǎng)基。