[發明專利]一種用于檢測單核細胞吞噬能力的試劑盒

有效

• 申請號: 201010233980.1
• 申請日: 2010-07-22
• 公開（公告）號: CN102337321A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發明（設計）人: 韓紅兵;牟進菲;連正興
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.一種用于檢測單核細胞吞噬能力的試劑盒，包括經染料染色的腫瘤細胞。

2.經染料染色的腫瘤細胞在制備用于檢測單核細胞吞噬能力的試劑盒中的應用。

3.根據權利要求1所述的試劑盒或權利要求2所述的應用，其特征在于：所述試劑盒包括細胞儲存液，所述經染料染色的腫瘤細胞混合于所述細胞儲存液中；所述細胞儲存液由磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氯化鈉和水組成，磷酸二氫鈉在所述細胞儲存液中的濃度為1.14g/L，磷酸氫二鈉在所述細胞儲存液中的濃度為0.2g/L，氯化鈉在所述細胞儲存液中的濃度為8g/L。

4.根據權利要求1或3所述的試劑盒或權利要求1或3所述的應用，其特征在于：所述試劑盒包括單核細胞培養液和二甲基亞砜；

所述單核細胞培養液為添加胎牛血清的RPMI-1640培養基，胎牛血清在所述單核細胞培養液中的濃度為10％(體積百分含量)。

5.根據權利要求1、3或4所述的試劑盒或權利要求1、3或4所述的應用，其特征在于：所述試劑盒由所述經染料染色的腫瘤細胞、所述細胞儲存液、單核細胞培養液和二甲基亞砜組成；所述經染料染色的腫瘤細胞混合于所述細胞儲存液中。

6.根據權利要求1-5中任一所述的試劑盒或權利要求1-5中任一所述的應用，其特征在于：所述試劑盒中，所述經染料染色的腫瘤細胞在所述細胞儲存液中的濃度為1000個細胞/ml、2000個細胞/ml、4000個細胞/ml、6000個細胞/ml、8000個細胞/ml、10000個細胞/ml或12000個細胞/ml。

7.根據權利要求1-6中任一所述的試劑盒或權利要求1-6中任一所述的應用，其特征在于：所述經染料染色的腫瘤細胞是按照包括如下步驟的方法制備得到的：將所述腫瘤細胞預培養，得到預培養后的腫瘤細胞，將所述預培養后的腫瘤細胞與染料溶液混合，培養10h-12h或10h或12h，得到經染料染色的腫瘤細胞。

8.根據權利要求1-7中任一所述的試劑盒或權利要求1-7中任一所述的應用，其特征在于：所述預培養的方法包括如下步驟：將所述腫瘤細胞以10⁶個/ml密度接種于腫瘤細胞培養基中，置于37℃、5％CO₂的二氧化碳培養箱中培養，至所述腫瘤細胞匯合至60％-70％，得到所述預培養后的腫瘤細胞；

所述將所述預培養后的腫瘤細胞與染料溶液混合，培養10h-12h或10h或12h中，所述培養的方式為37℃、5％CO₂的二氧化碳培養箱中培養；

所述細胞培養基為DMEM培養基。

9.根據權利要求1-8中任一所述的試劑盒或權利要求1-8中任一所述的應用，其特征在于：所述腫瘤細胞為結直腸癌HCT-8細胞或293T細胞；

和/或，所述染料為3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽或熒光染料；所述熒光染料為PI、DAPI、Hoechst?33342、Hoechst?33258、EB、cy3或cy5；

所述染料溶液由3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽和水組成，3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽在染料溶液中的濃度為0.5％(質量百分比)。

10.根據權利要求1-9中任一所述的試劑盒或權利要求1-9中任一所述的應用，其特征在于：所述用于檢測單核細胞吞噬能力的試劑盒為用于檢測雞單核細胞吞噬能力或羊單核細胞吞噬能力的試劑盒；所述雞為矮小雞，所述羊為薩福克羊。