[發明專利]一種利用稀土元素提高靈芝三萜產量的液體發酵方法

無效

• 申請號: 201010230701.6
• 申請日: 2010-07-20
• 公開（公告）號: CN101892282A
• 公開（公告）日: 2010-11-24
• 發明（設計）人: 姚強;高興喜;宮志遠;任鵬飛;韓建東;任海霞;劉巖;趙軍勝;曲玲;李瑾
• 申請（專利權）人: 山東省農業科學院土壤肥料研究所
• 主分類號: C12P33/00
• 分類號: C12P33/00;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 周慰曾

技術領域

本發明涉及發酵工程領域，具體涉及一種利用稀土元素提高靈芝三萜的液體發酵方法。?

背景技術

靈芝(Ganoderma?lucidum)為擔子菌綱、多孔菌科、靈芝菌屬真菌。在中國古代被盛傳為仙草，古代醫學家發現靈芝通過扶正固本使人體處于平衡狀態。靈芝三萜是靈芝最主要的生理活性物質之一，現代藥理學研究表明靈芝具有抗腫瘤、抗衰老、防止動脈硬化等作用，以及護肝保肝、抗病毒、抗輻射等功能。在靈芝藥用價值被廣泛揭示的同時，靈芝三萜的產量成為抑制其應用的限制因素，因為在自然界中野生靈芝十分稀少，遠不能滿足人們的需要。采用靈芝液體發酵的方法生產靈芝三萜因為具有生產周期短、勞動力省以及受外部環境影響小等優點被認為是一種有效的方法。?

但靈芝三萜的發酵水平不高，產量偏低限制了其工業化生產的發展。目前，國內外學者對靈芝三萜的發酵研究主要集中在培養基組成、溶氧、pH值及產物提取分離等工藝層面上，對靈芝三萜發酵水平提高有限，還不能滿足現代工業化發酵生產的需要。?

CN101353689A(CN200810143120.1)公開了一種提高靈芝發酵液中靈芝三萜產量的方法，使用靈芝屬Ganoderma?lucidum(Leyss?ex?Fr.)Karst.的菌種，菌株保藏號為CCGMC5.616，通過如下步驟進行：1、將靈芝菌種接種含有碳源、氮源、礦物元素成分的培養基，在溫度為26-30℃、轉速為130-180r/min條件下回轉式深層發酵1～5天；2、補加棕櫚酸1.5-3.0g/L后，在溫度為25-30℃、轉速為100-180r/min條件下回轉式深層發酵3～6天結束；3、從發酵液中提取靈芝三萜，產量為396.2mg/L。該發明僅提取了發酵液中三萜(即胞外三萜)的產量，發酵菌絲體三萜(即胞內三萜)沒有涉及，使產量部分損失。稀土元素是化學元素周期表中鑭系元素及兩個相關元素鈧和釔的總稱，我國稀土資源豐富，占世界貯量的80％。目前，稀土元素的應用越來越廣泛，不僅應用于各工業部門，其在農業、醫藥、微生物等生物學領域的應用研究也越來越活躍。近年來有關利用稀土元素提高微生物發酵產物的研究也有報道，參見王怡平等.稀土元素對紅酵母的生長及類胡蘿卜素合成的影響.微生物學通報，1999，26(2)：117-119；以及李增利.稀土元素鐠、釹、鉺對紅菇多糖深層發酵的影響.食品科學，2007，28(12)：312-316。目前，稀土元素在靈芝液體發酵上的應用研究尚未見報道。?

發明內容

本發明旨在提供稀土元素在靈芝三萜液體發酵中的應用，同時提供稀土元素在靈芝三萜發酵中的使用方法，從而提供一種工藝簡單、成本低廉、效果顯著，利用稀土元素提高?靈芝三萜產量的液體發酵方法，本方法可用于靈芝三萜的工業化生產。?

本發明所述的靈芝三萜產量包括靈芝胞外三萜和胞內三萜產量。?

本發明的技術方案如下：?

一種利用稀土元素提高靈芝三萜產量的液體發酵方法，包括以下步驟：?

(1)將靈芝菌種接種到PD液體發酵培養基中進行發酵培養，培養條件為搖床轉速100～180r/min，溫度25～30℃，時間5～8天，得到靈芝種子液。?

所述的靈芝菌種為泰山赤靈芝(Ganoderma?lucidum)，菌種編號為CGMCC?No.5.644；?

所述的PD液體發酵培養基組成為馬鈴薯200g、葡萄糖20g和蒸餾水1000mL；?

(2)將步驟(1)制得的靈芝種子液按4-6％體積比接種量接入到含有濃度為0.001-0.15mmol/L稀土元素的PD液體培養基中進行發酵培養，培養條件為搖床轉速100～180r/min，溫度25～30℃，時間5～8天，得發酵液和靈芝菌絲體混合物，分離出發酵液及靈芝菌絲體備用。?

所述的稀土元素為鐠Pr³⁺、釹Nd³⁺或鑭La³⁺；?

所述的PD液體發酵培養基組成為馬鈴薯200g、葡萄糖20g和蒸餾水1000mL。?

(3)從步驟(2)所得的發酵液中提取靈芝胞外三萜，從靈芝菌絲體提取靈芝胞內三萜，采用現有技術即可。?