[發(fā)明專利]棘球白素B母核的分離方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010229390.1
• 申請(qǐng)日: 2010-07-16
• 公開（公告）號(hào): CN102336817A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李繼安;陳代杰;盧亮;樊偉明;俞建生;姚黎棟;石飛燕;秋祥
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江震元制藥有限公司;上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
• 主分類號(hào): C07K7/56
• 分類號(hào): C07K7/56;C07K1/22;C12P21/04;C12R1/045
• 代理公司: 北京市金杜律師事務(wù)所 11256
• 代理人: 鄭立柱;謝燕軍

1.棘球白素B母核的分離方法，該方法包括如下步驟：

1)含棘球白素B母核的轉(zhuǎn)化液抽濾后，將濾液pH調(diào)整到5-8，上大孔苯乙烯非極性吸附樹脂，用水甲醇溶液洗脫，再用甲醇水溶液將棘球白素B母核集中洗下；

2)將步驟1)收集液上大孔丙烯酸樹脂，再用酸水溶液將棘球白素B母核集中洗下；

3)將步驟2)收集液的pH調(diào)整到4-5，然后濃縮凍干制得棘球白素B母核。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，所述含棘球白素B母核的轉(zhuǎn)化液按照下列步驟得到：將培養(yǎng)好的轉(zhuǎn)化用菌體放入pH為6.0-7.0的磷酸緩沖液懸浮，加入棘球白素B母核精制品混勻，25-30℃下進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)3-5小時(shí)，得到含棘球白素B母核的轉(zhuǎn)化液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟1)中水甲醇溶液的濃度為5％-15％。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟1)中水甲醇溶液的濃度為9％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟1)中甲醇水溶液的濃度為33％-100％。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟1)中甲醇水溶液的濃度為50％。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟1)中使用的水甲醇溶液和甲醇水溶液的體積均為2-4CV；步驟2)中使用的酸水溶液的體積為2-4CV。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟2)中的大孔丙烯酸樹脂用乙醇或甲醇預(yù)洗除雜。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟2)中的酸水溶液選自鹽酸水溶液、硝酸水溶液或磷酸水溶液。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟2)中的酸水溶液為鹽酸水溶液。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟2)中的酸水溶液的濃度為0.005-0.5N。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟2)中的酸水溶液的濃度為0.01N。

13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的棘球白素B母核的分離方法，其特征在于，步驟1)和2)中的上柱流速為1％CV/min，洗脫流速為2％CV/min。