[發(fā)明專利]重組人源化抗CD20單克隆抗體

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010225371.1
• 申請(qǐng)日: 2010-07-13
• 公開（公告）號(hào): CN102329394A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 侯盛;李博華;張大鵬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海中信國(guó)健藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): C07K16/28
• 分類號(hào): C07K16/28;C12N15/13;C12N15/85;A61K39/395;A61P35/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種重組人源化抗CD20單克隆抗體。

背景技術(shù)

非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)是最常見的淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤，好發(fā)于青壯年，其中絕大多數(shù)為B細(xì)胞來源，約占85％。在未治療狀態(tài)下，低度和部分中度惡性NHL如小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤和濾泡型淋巴瘤的生長(zhǎng)形式往往呈惰性過程，中位生存期為5～9年。它們對(duì)首次化療敏感，但很容易復(fù)發(fā)或耐藥，當(dāng)再次化療或放療時(shí)，療效明顯降低，因而被認(rèn)為是難以治愈的惡性腫瘤。而一些高度惡性的NHL則死亡率極高。

近年來，針對(duì)細(xì)胞表面分子的抗原靶向性治療已取得了巨大進(jìn)展并成為一種非常有發(fā)展前途的治療方法，其中被廣泛使用且富有成效的是抗CD20的單抗制劑[Maloney?DG.Immunotherapy?for?non-Hodgkin′s?lymphoma：monoclonal?antibody?and?vaccines.J?Clin?Oncol.2005Sep?10；23(26)：6421-6428]。

CD20抗原是非結(jié)合性單抗療法的一個(gè)理想靶點(diǎn)，因?yàn)樵摽乖哂锌寺√禺愋裕瑑H表達(dá)于所有的前B細(xì)胞和成熟B細(xì)胞，而不表達(dá)于造血干細(xì)胞、漿細(xì)胞和其他造血細(xì)胞系；同時(shí)，CD20分子在B淋巴瘤細(xì)胞表面的表達(dá)量異常增高，磷酸化增加，與B細(xì)胞淋巴瘤的發(fā)生密切相關(guān)。CD20分子在超過95％的B細(xì)胞性NHL中均有表達(dá)，且抗原分子在膜上比較暴露，容易接近，與單抗結(jié)合后無顯著內(nèi)化和脫落，也不會(huì)因與抗體的結(jié)合而發(fā)生抗原調(diào)變，因此成為治療B細(xì)胞淋巴瘤的理想靶點(diǎn)。

CD20單抗療法在治療B細(xì)胞淋巴瘤中已取得了令人滿意的效果，目前抗CD20抗體主要有以下幾種，按照其發(fā)揮抗腫瘤作用的不同功能分為兩大類：(1)主要通過CDC、ADCC(CDCC)作用發(fā)揮功能的：C2B8、1F5、2H7、2F2(2)主要通過凋亡、ADCC(CDCC)作用發(fā)揮功能的：B1、11B8。美國(guó)IDEC?phamaceutical公司針對(duì)B細(xì)胞淋巴瘤生產(chǎn)的人鼠嵌合抗CD20單克隆抗體Rituximab-C2B8是第一個(gè)經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于治療淋巴瘤的抗體。1997年批準(zhǔn)上市。美羅華是一種嵌合型IgG1免疫球蛋白，它是通過轉(zhuǎn)染相關(guān)基因結(jié)構(gòu)到倉(cāng)鼠卵細(xì)胞后表達(dá)的基因產(chǎn)物。美羅華含1328個(gè)氨基酸，分子量約144KD，由鼠抗CD20單克隆抗體的可變區(qū)Fab和人IgG1抗體穩(wěn)定區(qū)Fc片段構(gòu)成。

雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的鼠源單克隆抗體進(jìn)入人體后可能引起人抗鼠抗體免疫應(yīng)答human?antimouse?antibody?response(HAMA)[Winter?G，Harris?WJ.Humanized?antibodies.Immunol?Today.1993Jun；14(6)：243-6]。因此，如何通過基因工程技術(shù)來構(gòu)建抗降低鼠源抗體的免疫原性的抗體，有效地減少HAMA反應(yīng)的發(fā)生率是本領(lǐng)域的技術(shù)人員急于解決的問題。