[發明專利]用于防除連作煙草青枯病的拮抗菌NJL-14

有效

• 申請號: 201010222337.9
• 申請日: 2009-09-18
• 公開（公告）號: CN101886055A
• 公開（公告）日: 2010-11-17
• 發明（設計）人: 沈其榮;劉艷霞;楊興明;徐陽春;沈標
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;C12R1/085
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

本申請為分案申請，原申請為，發明名稱：防除連作煙草青枯病的拮抗菌及用其微生物有機肥料，申請號：200910183359.6。

一、技術領域

本發明涉及能防除連作煙草青枯病的拮抗菌及用其制成的微生物有機肥料，屬于農業集約化生產技術領域，專用于克服和消除連作煙草青枯病問題。

二、背景技術

煙草是我國主要的經濟作物，其質量的優劣關系著國計民生。煙草青枯病是煙草的主要病害之一，危害嚴重，謂之“煙癌”。1880年首次發現于美國，目前，在我國西南煙區普遍發生，在疫區常呈暴發流行，造成毀滅性損失，發病嚴重時產量損失80％左右。煙草青枯病是一種發病嚴重的土傳性細菌性病害，該病廣泛分布于全世界的熱帶、亞熱帶和一些溫暖的地區。在中國，此病在河南、山東、江蘇、云南、廣西、河北、湖南、廣東、福建等地普遍發生，成為影響我國煙草產量及質量的罪魁禍首之一。煙草青枯病致病菌(Ralstonia?solanacearum)能通過土壤、流水(灌溉等)、種子等方式傳播，對環境有很強的適應能力。青枯菌侵染土壤初期，由于病原菌數量少，植株表現為生長受限，矮小，畸形，易感病，農民往往認為是養分問題而加大氮肥投入，導致土壤中微生物群落進一步失衡，病原菌在根際占據優勢地位，煙草青枯病發生。在高溫高濕的條件下，病害發展迅速，發病嚴重的田塊發病率達100％，造成絕收。

另一方面，水稻、小麥、玉米、油菜等作物秸稈就地焚燒、規模化養殖后的畜禽糞便隨地棄置等不僅嚴重污染了環境，也極大地浪費了能作為有機肥和生物有機肥產品的原料；大量的養分資源(C、N、P、K、S及微量元素)流失于土壤-植物系統之外，明顯地削弱了我國農業可持續發展的能力。如何將從土壤中因收獲作物取走的營養元素最大限度地歸還到土壤中去，唯一的途徑就是將這些固體有機廢棄物制成商品有機肥，再施入土壤。如果將這些固體有機廢棄物經過高溫發酵合成高品位的有機堆肥，再用于功能菌的載體，所制成的微生物有機肥料功能明確，將會有很好的應用前景。

三、發明內容

1.技術問題

本發明的目的在于研制一種能防除煙草青枯病的拮抗微生物有機肥料，防治效率達到80％以上，使大量的連作障礙土壤得到生物修復，確保集約化農業的順利發展。

2.技術方案

用于防除連作煙草青枯病的拮抗菌，包括菌株NJL-25和菌株NJL-14，其中，

菌株NJL-25屬于短短芽孢桿菌(Brevibacillus?brevis)，2009年7月9日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCC?NO.3175，主要生物學特性為：革蘭氏染色陽性G⁺，細胞形狀為桿狀，在膨大孢囊內含橢圓形芽孢，菌落平滑，嚴格好氧生長，接觸酶陰性、V.P.反應陰性，甲基紅試驗陰性，發酵蔗糖、果糖、甘露醇、山梨醇等產酸不產氣，硝酸還原酶陰性，淀粉水解陰性，明膠水解陽性，分解酪蛋白陽性，不產生硫化氫，產生吲哚，最適生長溫度30℃，最適pH為7.0；

菌株NJL-14屬于蠟狀芽孢桿菌(Bacillus?cereus)，2009年7月10日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCC?NO.3174，主要生物學特性為：革蘭氏染色陽性G⁺，細胞形狀為桿狀，孢囊無明顯膨大，芽孢圓形或柱形，中生或近中生。表面粗糙，扁平，不規則，兼性好氧生長，接觸酶陽性、V.P.反應陽性，甲基紅試驗陽性，發酵葡萄糖、蔗糖、果糖、麥芽糖、山梨醇等產酸不產氣，硝酸還原酶陽性，淀粉水解陽性，明膠水解陽性，分解酪蛋白陽性，不產生硫化氫和吲哚，最適生長溫度30℃，最適pH為7.0。

用上述拮抗菌所生產的防除連作煙草青枯病的微生物有機肥料，其特征在于：該肥料中分別含有1×10¹⁰個/g以上的拮抗菌NJL-25和NJL-14、全氮質量比含量為4～5％，全氮中質量比90％以上為有機氮，總氮磷鉀養分質量比為6～10％、有機質質量比含量為30～35％。

所述防除連作煙草青枯病的微生物有機肥料的生產方法，包括：