[發(fā)明專利]一種油菜葉片可溶性蛋白含量快速檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010219042.6
• 申請(qǐng)日: 2010-07-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101900680A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-12-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何勇;劉飛;孔汶汶
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/49
• 分類號(hào): G01N21/49;G01N21/35
• 代理公司: 杭州天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及油菜檢測(cè)領(lǐng)域，尤其涉及一種油菜葉片可溶性蛋白含量快速檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

油菜是我國(guó)主要的油料作物和蜜源作物之一，油菜的種植面積占全國(guó)油料作物總面積的40％以上，產(chǎn)量占全國(guó)食用植物油總產(chǎn)量的60％以上，居世界首位。油菜不同時(shí)期的生長(zhǎng)狀況關(guān)系到油菜籽的產(chǎn)量和質(zhì)量。油菜葉片中的可溶性蛋白質(zhì)含量是油菜生長(zhǎng)過(guò)程中一項(xiàng)非常重要的養(yǎng)分和生理指標(biāo)，對(duì)油菜葉片養(yǎng)分和有機(jī)物積累等生理過(guò)程有重要意義。因此可以通過(guò)檢測(cè)油菜葉片中的可溶性蛋白質(zhì)含量，得到油菜的生長(zhǎng)狀況。近年來(lái)，由于農(nóng)村勞動(dòng)力的減少，油菜種植中使用了大量的除草劑。有些除草劑是一種生長(zhǎng)抑制劑，例如丙酯草醚，可以阻止直鏈氨基酸的生物合成，具有對(duì)油菜安全、殺草譜較廣、除草活性高、持效期長(zhǎng)，且低毒、低殘留，與環(huán)境相容等特點(diǎn)。對(duì)油菜葉片中可溶性蛋白質(zhì)含量的檢測(cè)，可以反映出某些除草劑對(duì)油菜養(yǎng)分狀況和有機(jī)物積累的影響，對(duì)實(shí)現(xiàn)油菜生長(zhǎng)狀況的大田檢測(cè)和連續(xù)監(jiān)測(cè)，提高油菜籽的產(chǎn)量和質(zhì)量有重要意義。

傳統(tǒng)的油菜葉片可溶性蛋白含量測(cè)定根據(jù)Bradford法(Bradford?MM.1976.A?rapid?and?sensitive?method?for?the?quantitative?of?microgramquantities?of?protein?utilizing?the?principle?of?protein-dye?binding.Analyt.Biochem.72，248-54)，吸取酶液用考馬斯亮藍(lán)法進(jìn)行測(cè)定。該方法測(cè)量過(guò)程費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、化學(xué)消耗品昂貴，且對(duì)環(huán)境造成一定污染。因此，急需研究一種簡(jiǎn)單、快速、無(wú)損的油菜葉片可溶性蛋白質(zhì)含量檢測(cè)方法和技術(shù)。

可見(jiàn)/近紅外光譜可以反映物質(zhì)內(nèi)部的有機(jī)成分，特別是C-H、O-H、N-H等基團(tuán)的倍頻和合頻吸收，可用于定量測(cè)定物質(zhì)有機(jī)物質(zhì)的含量。光譜技術(shù)已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、石油化工、制藥、飼料等行業(yè)。在植物生命信息快速檢測(cè)研究中具有廣泛的應(yīng)用潛力。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種油菜葉片可溶性蛋白質(zhì)含量快速檢測(cè)方法，解決了現(xiàn)有檢測(cè)方法費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、操作復(fù)雜、污染環(huán)境等問(wèn)題。

一種油菜葉片可溶性蛋白含量快速檢測(cè)方法，包括以下步驟：

(1)將油菜葉片殺青、烘干后粉碎，得到葉片粉末；

(2)分別采集波長(zhǎng)2208nm、2174nm、2236nm、1398nm、1422nm、2258nm、2282nm、1730nm、1890nm、1684nm、2366nm、1250nm、1658nm、1602nm、1462nm、2304nm、1910nm、2418nm、1858nm和2048nm光波所對(duì)應(yīng)的油菜葉片的反射率；

(3)將各反射率分別代入多元線性回歸方程：y＝10000*(53.15λ₁-43.39λ₂-32.77λ₃-52.50λ₄+54.04λ₅+24.95λ₆-14.24λ₇-43.73λ₈-29.69λ₉+47.87λ₁₀+16.31λ₁₁+14.64λ₁₂-30.90λ₁₃+24.20λ₁₄-24.52λ₁₅-1.159λ₁₆+6.542λ₁₇-7.164λ₁₈+26.40λ₁₉+11.21λ₂₀)+1779.728，計(jì)算油菜葉片中可溶性蛋白質(zhì)含量；

方程中y為油菜葉片可溶性蛋白質(zhì)含量，單位為μg/g?FW；λ₁～λ₂₀分別為波長(zhǎng)2208nm、2174nm、2236nm、1398nm、1422nm、2258nm、2282nm、1730nm、1890nm、1684nm、2366nm、1250nm、1658nm、1602nm、1462nm、2304nm、1910nm、2418nm、1858nm和2048nm光波所對(duì)應(yīng)的油菜葉片粉末樣本的反射率。