[發明專利]土壤中獲得純凈線蟲孢囊的方法

無效

• 申請號: 201010208204.6
• 申請日: 2010-06-24
• 公開（公告）號: CN102297792A
• 公開（公告）日: 2011-12-28
• 發明（設計）人: 李秀花;馬娟;陳書龍
• 申請（專利權）人: 河北省農林科學院植物保護研究所
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及農業土壤害蟲防治領域，尤其是涉及一種土壤中獲得純凈線蟲孢囊的方法。

背景技術

孢囊線蟲是世界農業生產中的重要線蟲病害種類，其中大豆孢囊線蟲、小麥禾谷孢囊線蟲、馬鈴薯金線蟲等孢囊線蟲均給世界各地的農業生產造成巨大的經濟損失，為了降低因孢囊線蟲給農產品帶來的損失，世界各國均對孢囊線蟲進行了深入的研究，對孢囊線蟲進行研究的前提是首先要將孢囊線蟲從土壤中分離出來，從土壤中直接分離線蟲孢囊是各種孢囊線蟲研究的重要技術手段。

目前將線蟲孢囊直接從土壤中分離的技術手段主要有利用錐形瓶的簡易分離法和利用范韋克(Fenwick)漂浮器分離法，但上述方法分離的前提是首先需要將土壤風干，處理時間較長，而且需要使用特定容器，由于受分離容器體積的限制，分離土樣量較小，不能夠快速而大量地從土壤中直接分離線蟲孢囊。

發明內容

本發明的目的是提供一種土壤中獲得純凈線蟲孢囊的方法，能夠縮短原有方法從土壤中獲得純凈線蟲孢囊的時間，并可增加一次性獲得純凈線蟲孢囊的數量。

為實現上述目的，本發明提供了一種土壤中獲得純凈線蟲孢囊的方法，包括：

步驟101，在第一容器中將破碎后的含線蟲孢囊的土壤與水按比例混合，攪拌后靜置20-40秒，將第一容器內的上清液倒入套篩上，所述套篩包括上層網篩和底篩，將第一容器內的沉淀物按上述方法連續處理2-3次后將所述上層網篩上的殘余物中的線蟲孢囊用水沖洗到所述底篩上；

步驟103，將步驟101中所述底篩上的殘余物用水沖洗到第二容器中，攪拌后沉淀1.5-5分鐘，去除漂浮在第二容器內懸浮液表面的有機質和空、癟線蟲孢囊，然后倒掉第二容器中的上清液，按上述方法沖洗步驟101中所述底篩上的殘余物2～3次；

步驟105，將所述第二容器中倒掉上清液后的沉淀物倒入套篩中，用水沖洗所述套篩的上層網篩；

步驟107，將步驟105中所述套篩的底篩上的殘余物沖入漂浮液中，攪拌后靜置1-2分鐘，將上述漂浮液中的漂浮物即線蟲孢囊倒入所述底篩上，用水沖洗干凈。

因此，本發明通過采用上述從土壤中獲得純凈線蟲孢囊的方法，能夠縮短原有方法從土壤中獲得純凈線蟲孢囊的時間，并可增加一次性獲得純凈線蟲孢囊的數量。

下面通過附圖和實施例，對本發明的技術方案做進一步的詳細描述。

附圖說明

圖1為本發明土壤中獲得純凈線蟲孢囊的方法實施例的流程圖。

具體實施方式

實施例一

圖1為本發明土壤中獲得純凈線蟲孢囊的方法實施例的流程圖，如圖1所示，包括：

步驟101，在第一容器中將破碎后的含線蟲孢囊的土壤與水按比例混合，所述土壤與水的比例介于1∶5與1∶40之間，混合溶液中主要包括線蟲孢囊、有機質及較大的土壤顆粒，充分攪拌后靜置20-40秒，由于線蟲孢囊比重比水大，因此在此步驟中我們攪拌后只靜置20-40秒，此時線蟲孢囊還沒沉淀，存在于第一容器內的上清液中，而破碎后的土壤中的較大的土壤顆粒則會沉淀，通過對靜置時間的控制，將破碎后的土壤中的較大的土壤顆粒去除，然后將第一容器內的上清液倒入套篩上，本實施例中所述套篩均包括上層網篩和底篩，不過本實施例中不同步驟中的套篩的上層網篩和底篩的目數可以不同。倒入套篩后，線蟲孢囊和部分有機質會保留在所述套篩的上層網篩和底篩上，然后將第一容器內的沉淀物按上述方法連續處理2-3次，使得土壤中的線蟲孢囊能夠全部被沖洗到套篩上，然后再沖洗所述上層網篩，將所述上層網篩上的殘余物中的線蟲孢囊全部用水沖洗到所述底篩上，通過所述上層網篩將殘余物中比線蟲孢囊大的有機質去除，通過所述底篩將殘余物中比線蟲孢囊小的有機質去除，本步驟中所述第一容器為10-70L圓筒狀容器，所述上層網篩介于20目和30目之間，所述底篩介于60目和80目之間。

步驟103，將步驟101中所述底篩上的殘余物用水沖洗到第二容器中，此時殘余物中只有大小與線蟲孢囊近似的有機質，攪拌后沉淀1.5-5分鐘，去除漂浮在第二容器內懸浮液表面的有機質和空、癟線蟲孢囊，本實施例中采用棉布擦拭去除漂浮在第二容器內懸浮液表面的有機質和空、癟線蟲孢囊，由于線蟲孢囊比重比水大，在本步驟中的沉淀時間內將會沉淀，然后倒掉第二容器中的上清液，按上述方法沖洗步驟101中所述底篩上的殘余物2～3次，使得所述底篩上的殘余物能夠完全轉移到所述第二容器中，并將殘余物中的有機質和空、癟線蟲孢囊去除，本步驟中所述第二容器為5-20L圓筒狀容器。