[發明專利]醌類化合物在制備抗結核菌藥物中的應用

有效

• 申請號: 201010204766.3
• 申請日: 2010-06-18
• 公開（公告）號: CN101862314A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發明（設計）人: 佘志剛;賴小敏;林永成;陳省平;黃宇虹;陳洪;陳伊
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A61K31/122
• 分類號: A61K31/122;A61P31/06
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳衛

技術領域

本發明涉及藥物化合物應用領域，具體涉及醌類化合物在制備抗結核菌藥物中的應用。

背景技術

自從20世紀60是年代從海洋真菌中發現頭孢菌素以來，海洋微生物的代謝產物日益成為了藥物的豐富來源。根據John教授在1010年《Natural?Product?Reports》的報道，2008年發現海洋天然產物新化合物首次超過1000種，海洋微生物是主要來源之一(約占23％)。

由于海洋微生物的特殊環境，能代謝結構新穎的化合物，并且具有良好的藥理活性，已經發現大量的抗腫瘤，治療心血管疾病，免疫調節劑等活性化合物。此外，海洋微生物易于采集和培養，人工發酵產生的代謝產物比高等生物所含的物質更易提純，成本更低，符合可持續發展的資源開發原則，所以從中篩選到的活性化合物更利于工業化生產。因此海洋微生物被認為是尋找藥理活性物質的新源泉。

近年來全球結核病的發病呈增高趨勢，據世界衛生組織(WHO)估計，目前全球受結核分枝桿菌(Mycobacterium?tuberculosis，MTB)感染的人口占世界人口的三分之一，其中5～10％的感染者成為結核病患者。我國每年出現活動性肺結核病人130萬例，其中傳染性肺結核約60萬例，是全球結核病高負擔國家之一。

自抗結核藥物相繼問世，使結核病的治療起到劃時代的變化。然而由于結核病患者的治療管理尚不十分規范，不規則化療，濫用抗結核藥物，使結核病耐藥情況日益嚴重，且耐藥性的變化更趨向于多種藥物同時耐藥，這給結核病的防治工作造成極大困難。因此尋找新的抗結核藥物，尤其是抗多藥耐藥性的抗結核藥物對保護人民身體健康，具有重要意義。

來源于南海海洋真菌Halorosellinia?sp.1403(以下簡稱真菌1403)醌類化合物1403B和1403C，其結構式如式(I)

其中：

(1)R＝H時，化合物為1403B。

(2)R＝OH，化合物為1403C。

夏雪奎，中山大學博士學位論文(2007年)和佘志剛，陳省平，林永成等專利，醌類化合物Bostrycin及其制備方法與抗腫瘤應用，申請號：200810028628.3，公開號CN101544556，已經給出了1403B和1403C的提取方法，結構分析方法及其抗腫瘤應用。目前尚未見1403B和1403C具有抗結核活性的相關報道。

發明內容

本發明的目的在于根據現有醌類化合物研究中未發現其具有抗結核活性的報道的現狀，提供了醌類化合物在制備抗結核菌藥物中的應用。

本發明目的通過以下技術方案予以實現：

本發明醌類化合物可從南海紅樹林真菌Halorosellinia?sp.1403的發酵培養液中提取分離得到。所述醌類化合物的結構通式如式(I)所示，其中，當R為H時，醌類化合物為1403B；當R為OH時，醌類化合物為1403C：

上述醌類化合物制備方法的具體步驟如下：

(1)真菌Halorosellinia?sp.1403(CCTCC?NO：M?201018)的種子培養：

培養基按重量比為：葡萄糖0.5～1.5，酵母提取物0.05～0.15，蛋白胨0.1～0.3，瓊脂1～1.5，氯化鈉3～5，水100，制成試管斜面，挑取菌株接入斜面，30～35℃培養5-7天；

(2)真菌Halorosellinia?sp.1403的發酵培養：

發酵培養基按重量比為：葡萄糖5～15，酵母提取物1～4，蛋白胨0.5～4，氯化鈉3～5，水100，將斜面中培養好的菌株挑入發酵培養基，于室溫25～35℃靜置1～2個月；

(3)將上述培養好的發酵液過濾除去菌體得到培養液；

(4)真菌的培養液加熱濃縮(溫度不超過50℃)至原液體積的1/20～1/5，用乙酸乙酯萃取多次，濃縮乙酸乙酯萃取液，在硅膠柱中進行色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇為洗脫劑梯度洗脫；

(5)培養液浸膏經過柱層析后，收集30～80％的乙酸乙酯/石油醚洗脫液，45％乙酸乙酯/石油醚為洗脫液，再以聚酰胺柱層析分離，重結晶純化，即得到紅色顆粒狀晶體1403B，65％的乙酸乙酯/石油醚為洗脫液，再以聚酰胺柱層析分離，重結晶純化，即得到紅色顆粒狀晶體1403C。