[發(fā)明專利]一種采用MIT技術(shù)與SPR技術(shù)相結(jié)合檢測克倫特羅的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010204510.2
• 申請日: 2010-06-21
• 公開（公告）號: CN101881768A
• 公開（公告）日: 2010-11-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 韋天新;孟慧娟
• 申請（專利權(quán)）人: 北京理工大學(xué)
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N21/41
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種采用MIT技術(shù)與SPR技術(shù)相結(jié)合檢測克倫特羅的方法，其特征在于具體步驟如下：

1)首先在光學(xué)蓋玻片上通過真空蒸鍍法或濺射法鍍上一層20～100nm的金膜，以此作為金膜基底；

2)將功能單體與克倫特羅溶解在溶劑中，預(yù)聚合1-5h；

3)向第2)步得到的反應(yīng)液中加入交聯(lián)劑和引發(fā)劑，超聲5～10min后通氮?dú)獬?～10min；

4)用乙醇淋洗硅烷化載玻片，并用氮?dú)獯蹈桑儆梅饪谀ぞo粘在硅烷化載玻片的表面，然后在封口膜的中間區(qū)域加工出空白區(qū)域，作為成膜區(qū)域，得到附有支撐膜的硅烷化載玻片，載玻片上剩余的封口膜作為支撐膜；

5)取第3)步得到的反應(yīng)液滴加到附有支撐膜的硅烷化載玻片上，使反應(yīng)液充滿成膜區(qū)域，蓋上金膜基底并夾緊固定使二者中間沒有氣泡，放入密閉反應(yīng)器中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，55～70℃溫度下加熱反應(yīng)3.5～24小時；

6)加熱結(jié)束后將載玻片與金膜基底分開，分子印跡聚合物膜附著在金膜基底上，晾干后用洗脫液進(jìn)行洗脫金膜基底的分子印跡聚合物膜，得到克倫特羅分子傳感印跡芯片；

7)將第6)步制備的克倫特羅分子印跡傳感芯片固定在表面等離子體共振檢測儀上，將溶劑流過傳感芯片，待儀器顯示反射光強(qiáng)達(dá)到穩(wěn)定不變時，對反射光強(qiáng)按角度進(jìn)行掃描，記錄下SPR光譜圖；

8)將克倫特羅固體加入溶劑定容，制備不同濃度的克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照由低濃度到高濃度的順序，分別流過傳感芯片；每次流入克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)液時與傳感芯片反應(yīng)1-15min，然后流過溶劑，對反射光強(qiáng)按角度進(jìn)行掃描，記錄下此濃度的克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)液與傳感芯片發(fā)生吸附反應(yīng)后的SPR光譜圖，直到得到各個濃度的克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液與傳感芯片反應(yīng)后的SPR光譜圖；

9)分別將第8)步得到的不同濃度的克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液與傳感芯片反應(yīng)后的SPR光譜圖與第7)步得到吸附克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液前的SPR光譜圖進(jìn)行比較，計算各濃度下吸附反應(yīng)前后引起的SPR共振角的位移值Δθ；

10)以SPR共振角的位移值Δθ為縱坐標(biāo)，以加入的克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度值的負(fù)對數(shù)作為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

11)根據(jù)待測樣品與洗脫后的克倫特羅分子印跡芯片發(fā)生吸附反應(yīng)前后引起SPR共振角的位移值Δθ，在第10)步得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出對于克倫特羅的含量；

其中，克倫特羅與功能單體及交聯(lián)劑之間的摩爾比為1∶2～10∶4～20；引發(fā)劑與克倫特羅之間的摩爾比為1∶2～8；

所述的功能單體選自如下任意一種化合物：丙烯酸、甲基丙烯酰胺、甲基丙烯酸、三氟甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、亞甲基丁二酸；

所述的溶劑選自如下任意一種或兩種化合物：二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、砜類化合物或雜環(huán)類化合物；

所述的引發(fā)劑選自下列任意一種化合物：偶氮二異丁腈、偶氮二異庚腈、2，2-偶氮-雙(2，4-二甲基戊腈)或過氧化苯甲酰；

所述的交聯(lián)劑選自如下任意一種化合物：乙二醇二甲基丙烯酸酯、N，N-亞甲基二丙烯酰胺、季戊四醇三丙烯酸酯、季戊四醇四丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸醋或二乙烯基苯；

所述的洗脫液為乙酸與有機(jī)溶劑按1∶1～50的體積比混合，或水、乙酸與有機(jī)溶劑的體積比為1∶1～10∶1～500；所述的有機(jī)溶劑為甲醇或乙腈。