[發明專利]虎源性、豹源性DNA的PCR檢測引物、試劑盒及檢測方法無效
| 申請號： | 201010202970.1 | 申請日： | 2010-06-12 |
| 公開（公告）號： | CN101845508A | 公開（公告）日： | 2010-09-29 |
| 發明（設計）人： | 徐君怡;曹際娟 | 申請（專利權）人： | 徐君怡;曹際娟 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 大連東方專利代理有限責任公司 21212 | 代理人： | 趙淑梅 |
| 地址： | 116000 遼*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 虎源性 豹源性 dna pcr 檢測 引物 試劑盒 方法 | ||
【權利要求書】：
1.虎源性、豹源性DNA的PCR檢測引物，其特征在于：
引物序列：
正向引物(SEQ?ID?NO.1)：5’GAATATACTATGGCTCCTACAC?3’，
反向引物(SEQ?ID?NO.2)：5’GGTTGGCGGGGATGTAGTTA?3’。
2.虎源性、豹源性DNA的PCR檢測試劑盒，其特征在于該試劑盒中包括一種檢測溶液，該檢測溶液中含10×PCR緩沖液、10μmol/L正向引物、10μmol/L反向引物、10m?mol/L?dNTP、5U/μL?Taq?DNA聚合酶；
其中，所述的正向引物序列為SEQ?ID?NO.1，反向引物序列為SEQ?ID?NO.2。
3.虎源性、豹源性DNA的PCR檢測方法，其特征在于使用權利要求2所述的試劑盒，包括如下步驟：
①提取待測樣品DNA，得到模板DNA溶液；
②反應體系：取1μl步驟①制得的模板DNA溶液，加入上述試劑盒中的溶液6.2μl，再加入滅菌超純水至總體積25μl；將以上各組分加入至0.2mL?PCR反應管中，混勻，5000r/min，離心10s；
③步驟②的反應體系按下述條件進行實時熒光PCR檢測：
預變性：94℃，3min；
進入循環：94℃變性60s，66℃退火60s，72℃延伸60s，35次循環；
終止延伸：72℃，7min；
4℃保存反應產物。
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