[發明專利]藥品、保健食品中摻雜硝西泮的快速測定方法

有效

• 申請號: 201010195416.5
• 申請日: 2010-06-08
• 公開（公告）號: CN101865855A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發明（設計）人: 王鐵杰;肖麗和;楊敏;付春旺;殷果;王玨;黎雪清
• 申請（專利權）人: 深圳市藥品檢驗所
• 主分類號: G01N21/79
• 分類號: G01N21/79
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫;潘中毅

技術領域

本發明涉及一種硝西泮成分的檢測方法，具體是檢測藥品和保健食品中，尤其是用于檢測鎮靜安神類中藥制劑和養心安神功能保健食品中是否添加硝西泮成分的方法。

背景技術

硝西泮是苯二氮雜卓類鎮靜催眠藥，化學名稱為1，3-二氫-7-硝基-5-苯基-2H-1，4-苯并二氮卓-2-酮。主要治療失眠以及抗驚厥、嬰兒痙攣、肌陣攣癲癇。臨床藥理學研究表明，此藥物在鎮靜、催眠方面的藥效優于巴比妥類及其它類鎮靜、催眠藥，藥物過量一般不致引起生命危險，因此硝西泮臨床應用廣泛。

硝西泮為中樞神經抑制藥，可引起中樞神經系統不同部位的抑制，作用機制與其選擇性作用于大腦邊緣系統的杏仁核、海馬等苯二氮卓受體，促進γ-氨基丁酸抑制性神經遞質的釋放，從而引起突觸前和突觸后的抑制作用有關，具有鎮靜、催眠、抗焦慮作用。但是長期使用可產生耐受性和依賴性，常見嗜睡、運動失調、頭痛，甚至皮疹、白細胞減少、肝損傷、骨髓移植等不良反應。

作為中樞神經抑制藥物，硝西泮屬于處方藥，患者必須在醫生的指導下方能使用，國家藥監部門對其生產、經營及使用進行了嚴格的規定。但是，一些不法分子利用硝西泮藥物的鎮靜、催眠、抗焦慮的良好作用和中成藥、保健食品成分復雜、毒副作用小的特點，在鎮靜催眠類中藥制劑和保健食品中擅自添加硝西泮化學成分，夸大宣傳功效，抬高價格；有人甚至把它作為動物飼料添加劑，使動物嗜睡少動而生長加快，動物體內蓄積的藥物通過食物鏈進入人體，給人民群眾的身體健康造成了嚴重危害。特別在廣大的農村和經濟欠發達的中小城市，由于這些地區缺乏必要的檢驗儀器，加上技術監管能力薄弱，給了不法分子更多的造假和添加之機，導致大量假藥劣藥出現，造成了中藥制劑和保健食品市場的混亂。

檢驗鎮靜安神類中藥制劑、保健食品中是否添加硝西泮成分的現有方法主要有以下四種：

1、薄層色譜法

樣品中的待測成分經過甲醇提取，所得的供試品溶液與對照品溶液點在硅膠薄層板上，用展開劑展開，取出，晾干，置紫外燈254nm下檢視。在展開劑的作用下，由于不同物質的遷移速度不同，不同物質在薄層色譜板的不同位置以斑點的形式出現，根據待測樣品是否在與對照品相應的位置上出現斑點這一實驗所得的現象來判斷待測樣品是否含有目標成分。如果供試品溶液薄層色譜圖與硝西泮對照品相應的位置上出現斑點，則提示樣品中可能含有硝西泮成分。

薄層色譜法的優點是不需要昂貴的分析儀器。該法缺點是：(1)色譜分辨率較低，中藥制劑成分復雜，干擾因素多，易將某些共存成分誤判為硝西泮成分，某些共存成分如果量較大且色譜遷移值與待測成分接近，則會干擾目標成分的檢出。(2)色譜展開和晾干的時間長，不足以滿足快速測定的要求。(3)薄層色譜板需要烘干并干燥存放，環境溫度和濕度對分離效果的影響較大。(4)需要有固定的場所，不適合作流動性大的現場檢測。(5)要求實驗人員有較好的經驗。

2、高效液相色譜法

高效液相色譜法是常用的現代分析方法，在相同的色譜條件下，不同的物質有不同的色譜保留時間。在相同的色譜條件下硝西泮對照品溶液與樣品提取所得供試品溶液分別進樣，根據色譜峰保留時間可判斷待測樣品是否含有硝西泮成分。

高效液相色譜法的優點是色譜分離效率高、靈敏度高。缺點是：(1)儀器價格昂貴，樣品前處理時間長，色譜柱易受污染，分析成本高；(2)當共存的色譜峰保留時間與硝西泮色譜峰保留時間接近時容易做出錯誤的判斷；(3)儀器對使用環境的要求高，需要固定放置，不適合流動性大的現場檢測。

3、高效液相色譜-質譜聯用法

以高效液相色譜儀作為分離器、質譜儀作為分析器的高效液相色譜-質譜聯用法適合于成分復雜、背景干擾嚴重的樣品分析，這種分析方法可提高檢測結果的可靠性。

高效液相色譜-質譜聯用法是一種分析成本比高效液相色譜更高、操作更加復雜的分析方法。儀器對使用環境的要求更高，需要固定放置，不適合做流動性大的現場檢測。這些檢驗只能在少數實驗室中進行，不易推廣使用。

4、免疫層析色譜檢測法

硝西泮膠體金檢測試紙是由樣品墊、結合釋放墊、硝酸纖維素膜、吸水墊和塑料底板組成。其檢測原理是利用樣品墊形成的毛細管虹吸效應，使被測物質首先與膠體金標記的硝西泮多抗發生競爭形式的結合，當膠體金標記的抗硝西泮多抗過量時，多余的多抗漂移到檢測線，與硝西泮偶聯抗原結合而顯色。

免疫層析色譜檢測法的試紙制備過程耗時至少3個小時，且需要專業人員制備硝西泮偶聯多抗和抗硝西泮多抗，并且商品化的膠體金試紙造價不菲，實際推廣應用存在很大難度。