[發(fā)明專(zhuān)利]一種基因表達(dá)組合物、豬生殖與呼吸道綜合癥口服疫苗及其制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201010193569.6 | 申請(qǐng)日： | 2010-06-02 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN101988058A | 公開(kāi)（公告）日： | 2011-03-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 黃鵬林;杜宜殷;廖育辰;林宜佑;李盛新;黃暐芬 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 黃鵬林 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12N15/11 | 分類(lèi)號(hào)： | C12N15/11;C12N15/63;C12N15/29;C07K19/00;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 廣州華進(jìn)聯(lián)合專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44224 | 代理人： | 萬(wàn)志香;曾旻輝 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基因 表達(dá) 組合 生殖 呼吸道 綜合癥 口服 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.一種基因表達(dá)組合物，其特征在于，包含：
啟動(dòng)子；
編碼豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽的聚核苷酸；
NOS終結(jié)子；及
香蕉重泛素基因3’MAR的聚核苷酸，其具有如SEQ?ID?No：2的核苷酸序列；
其中該編碼豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽的聚核苷酸的5’端連接于該啟動(dòng)子的3’端，而該編碼豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽的聚核苷酸的3’端連接于該NOS終結(jié)子的5’端，該NOS終結(jié)子的3’端再與香蕉重泛素基因3’MAR的聚核苷酸的5’端連接；該啟動(dòng)子于含有該基因表達(dá)組合物的生物體內(nèi)，驅(qū)動(dòng)下游編碼勝肽的聚核苷酸的轉(zhuǎn)錄作用。
2.如權(quán)利要求1所述的基因表達(dá)組合物，其特征在于，所述編碼PRRSVORF5勝肽的聚核苷酸，其具有如SEQ?ID?No：1的核苷酸序列。
3.如權(quán)利要求1所述的基因表達(dá)組合物，其特征在于，所述啟動(dòng)子包含CaMV35S、香蕉重泛素基因啟動(dòng)子，其具有如SEQ?ID?No：3的核苷酸序列、或其他可于該生物體內(nèi)表達(dá)目標(biāo)基因的適用啟動(dòng)子。
4.如權(quán)利要求1所述的基因表達(dá)組合物，其特征在于，所述編碼豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽的聚核苷酸，其3’端可進(jìn)一步與編碼內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽的聚核苷酸的5’端連接；該編碼內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽的聚核苷酸的3’端與如權(quán)利要求1所述的NOS終結(jié)子的5’端連接。
5.如權(quán)利要求4所述的基因表達(dá)組合物，其特征在于，所述編碼內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽的聚核苷酸，其序列選自SEQ?ID?No：4或SEQ?ID?No：5。
6.如權(quán)利要求1所述的基因表達(dá)組合物，其特征在于，所述編碼豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽的聚核苷酸，其3’端可進(jìn)一步與編碼豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF6勝肽的聚核苷酸的5’端連接；該編碼豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF6勝肽的聚核苷酸，其3’端可進(jìn)一步與編碼內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽的聚核苷酸的5’端連接；該編碼內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽的聚核苷酸的3’端與如權(quán)利要求1所述的NOS終結(jié)子的5’端連接。
7.如權(quán)利要求1所述的基因表達(dá)組合物，其特征在于，所述啟動(dòng)子3’端可進(jìn)一步與編碼熱不穩(wěn)定毒素B次單元?jiǎng)匐牡木酆塑账岬?’端連接；其3’端與編碼L勝肽的聚核苷酸的5’端連接；該編碼L勝肽的聚核苷酸的3’端與如權(quán)利要求1所述的編碼豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽的聚核苷酸的5’端連接；該編碼豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽的聚核苷酸的3’端與編碼內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽的聚核苷酸的5’端連接；該編碼內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽的聚核苷酸的3’端與如權(quán)利要求1所述的NOS終結(jié)子的5’端連接；
其中該編碼熱不穩(wěn)定毒素B次單元?jiǎng)匐牡木酆塑账峋哂腥鏢EQ?ID?No：6的核苷酸序列；該編碼L勝肽的聚核苷酸，其聚核苷酸序列選自SEQ?ID?No：7、SEQID?No：8和SEQ?ID?No：9中至少一種。
8.一種重組融合蛋白，其特征在于，包含：熱不穩(wěn)定毒素B次單元?jiǎng)匐摹勝肽、豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽、豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF6勝肽及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽；
其中該熱不穩(wěn)定毒素B次單元?jiǎng)匐奈挥谥亟M融合蛋白的N端；該L勝肽的N端與LTB勝肽的C端連接；該L勝肽的C端與該豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽的N端連接；該豬生殖與呼吸綜合癥病毒ORF5勝肽的C端與該內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽的N端連接；該內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽位于重組融合蛋白的C端；
其中該熱不穩(wěn)定毒素B次單元?jiǎng)匐木哂腥鏢EQ?ID?No：10的氨基酸序列；該L勝肽，其氨基酸序列選自SEQ?ID?No：11、SEQ?ID?No：12和SEQ?ID?No：13中至少一種；該內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保留訊息勝肽具有如SEQ?ID?No：14的氨基酸序列。
9.一種基因表達(dá)載體，包含如權(quán)利要求1所述的基因表達(dá)組合物。
10.一種以植物生產(chǎn)的豬生殖與呼吸道綜合癥口服疫苗，其特征在于，包含如權(quán)利要求1所述的基因表達(dá)組合物。
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