[發明專利]膠陀螺子實體中具有光敏活性的苝醌類化合物的分離鑒定

無效

• 申請號: 201010192709.8
• 申請日: 2010-06-07
• 公開（公告）號: CN102267910A
• 公開（公告）日: 2011-12-07
• 發明（設計）人: 包海鷹;馬偉才
• 申請（專利權）人: 包海鷹
• 主分類號: C07C69/78
• 分類號: C07C69/78;C07C67/56;A61K31/235;A61K41/00;A61P35/00;A61P31/18
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技術領域：

本發明公開了膠陀螺子實體中具有光敏活性的物質為苝醌類化合物。苝醌(Perylenequinones；PQ)化合物是一類分布于自然界生物中的光敏色素。它們具有良好的光敏殺傷腫瘤細胞和抑制艾滋病毒的作用。現代研究驗證了苝醌類化合物的光敏活性及其抗腫瘤機制。光動力療法是一種比較新穎的治療方法，它利用某些光敏劑對腫瘤組織的選擇親和性及光動力殺傷作用，在不影響正常組織功能的前提下，造成腫瘤組織的定向損傷。屬于中藥有效成分提取制備及其在醫藥和保健品領域中的應用。?

背景技術：

膠陀螺主要分布在我國東北地區，尤其是吉林省長白山區產量較大，當地人們既喜歡它又害怕它。喜愛是因為產量大，好吃，口感好，有“嚼頭”，比木耳好吃；害怕是因為食用時稍有不慎，它能把人的嘴“拱”歪，且紅腫，見光后疼痛加重，難以忍受等，因此得其名“豬嘴蘑”或“拱嘴蘑”。?

膠陀螺屬于一種可食用的真菌，民間食用之前一般使用鹽水或堿水浸泡處理，但處理不當食用或食用過多后會引起四肢皮膚疼癢，產生灼熱感，粘膜腫脹，嘴唇翻腫，并伴有惡心，嘔吐，腹痛、腹瀉且見光后病情加重，顯現過敏性皮炎型中毒癥狀，常有食用過多或處理不當而中毒的報道。?

發明內容：

本發明公開了膠陀螺子實體中具有光敏活性的物質為苝醌類化合物，該化合物具有光敏活性。膠陀螺子實體中利用光敏活性成分的梯度跟蹤分離方法，本發明采用石油醚、氯仿和乙酸乙酯對膠陀螺子實體中的有效組分進行梯度提取，運用小鼠光敏活性有效組分的梯度提取分離跟蹤方法，對膠陀螺的有效組?分進行提取分離。結果表明，從分離出的組分中找到了光敏活性組分，主要在氯仿和乙酸乙酯提取物中，其中氯仿提取物的含量最高，活性最為明顯，并對各有效組分進行有效成分跟蹤方法，找到了光敏活性組分，并對其進行鑒定，初步鑒定其為1-(苯甲酸異丙酯基)-4，9-二羥基-12-甲基-11，12-二氫-3，10-苝醌。藥理實驗證實了膠陀螺子實體中具有光敏活性的物質為苝醌類化合物。?

1材料?

1.1藥物：受試藥物為膠陀螺子實體不同溶劑提取物。?

1.2動物：昆明小鼠，5-6周，18-22g，購于吉林大學實驗動物中心。?

1.3儀器及試劑：剪刀，鑷子，電子天平，注射器(1mL)，打孔器，5000mL燒杯，灌胃器，生理鹽水、70％醫用酒精、吐溫-80、SephadexLH-20、甲醇、無水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿、正己烷、乙醚、濃硫酸(分析純??北京化學試劑有限公司)、薄層層析硅膠、柱層硅膠(青島海洋化工有限公司)?

2方法和結果?

2.1方法?

2.1.1藥物的配制：每個組分均用生理鹽水配制，若不溶，則先用少量吐溫-80溶解，再用生理鹽水定容至所需體積，每種藥物均在給藥的前一個晚上配好，放在4℃的冰箱中，給藥前將藥物恢復到室溫并搖勻。受試藥的濃度見表1，光敏活性成分跟蹤流程圖見圖1。?

表3-1受試藥的濃度?

Table?1?concentration?of?testing?drug?

*為有效組分?

2.1.2步驟：將剛購進的小鼠用剪刀把背部的毛剪干凈，24h后將小鼠隨機分組，每組10只，然后給小鼠稱重，同時將小鼠灌胃給藥，灌胃體積為0.2mL/10g，對照組用生理鹽水灌胃，灌胃體積為0.2mL/10g，灌胃0.5h后，將各組小鼠分別置于燒杯(5000mL)中，在日光下照射，觀察小鼠背部、耳部和尾部皮膚的變化情況及小鼠的狀態，照射2h后避光放置，次日用同樣的方法重復一次，然后處死，用直徑5mm和7mm的打孔器取下兩耳和背部固定部位皮膚稱重。?

計算結果及統計：按下式計算耳指數和皮指數，然后用統計軟件SPSS18.0進行數理統計，結果可反映實驗材料的光敏活性程度。?

耳指數＝[耳片重(mg)/體重(g)]×100?

皮指數＝[皮片重(mg)/體重(g)]×100?

2.2結果?

2.2.1氯仿、乙酸乙酯及丙酮粗提物光敏活性結果?

氯仿、乙酸乙酯、丙酮粗提物光敏活性指標見下表2，小鼠見光后頭部腫脹的程度、取耳片、皮片過程及中毒后小鼠頭部脫毛情況，見圖2、圖3、圖4。從表2中數據可看出，氯仿粗提取、乙酸乙酯粗提取與生理鹽水組比較，均具有極顯著差異。?