[發明專利]一種降解硫代葡萄糖甙的復合菌系及其應用無效

申請號：	201010184705.5	申請日：	2010-05-27
公開（公告）號：	CN101899396A	公開（公告）日：	2010-12-01
發明（設計）人：	金青哲;王小三;王興國	申請（專利權）人：	江南大學
主分類號：	C12N1/00	分類號：	C12N1/00;C12N1/14;C12N1/16;A23K1/14;C12R1/645;C12R1/66;C12R1/74
代理公司：	暫無信息	代理人：	暫無信息
地址：	214122 江***	國省代碼：	江蘇;32
權利要求書：	查看更多	說明書：	查看更多
摘要：
搜索關鍵詞：	一種降解葡萄糖復合及其應用
鉆瓜網技術展會專利詞庫專利權人專利榜在售專利公布日期熱門專利

【說明書】：

技術領域

本發明涉及到一種降解硫代葡萄糖甙的復合菌系及其應用，屬于應用微生物技術領域。?

技術背景

菜粕中含有較高的蛋白含量。但是由于菜籽粕中含有植酸、單寧、粗纖維等抗營養因子，尤其是硫代葡萄糖甙(簡稱硫甙)。目前已從數百種植物中發現120多種硫甙。硫甙能引起飼用動物甲狀腺腫大，從而造成其生長發育遲緩，使菜籽粕難以作為優質飼料蛋白資源加以充分應用的原因所在，所以脫除菜籽粕中硫甙顯得尤為重要。目前，脫除硫甙方法有物理法、化學法、生物法和遺傳學方法等，物理化學發往往有較好的硫甙脫除效果，但會造成大量的蛋白質損失，同時使用有機溶劑會造成一定的環境污染、物料的干燥需要大量的能量以及只能對其中的一種抗營養因子起脫除作用等諸多缺陷。遺傳法是未來重點發展的方向。微生物固態發酵發由于具有經濟、對環境污染小、簡便和脫毒徹底等優點。是目前國內進行菜籽粕生物脫毒主要方式。?

然而硫甙是含有不同烴基的一類物質，烴基可以是烷烴、烯烴以及芳香烴等多種情況，而酶又具有高度的專一性，一種酶往往只能對其中的一種物質起降解作用，單菌固態發酵所產生酶系較單一，往往造成硫甙降解效率不高，同時當前研究菜粕硫甙降解時沒有考慮對其中的單寧、植酸、粗纖維和蛋白質的含量的影響。本實驗所采用的兩株霉菌具有很好的硫甙降解效果，據報道熱帶假絲酵母具有較好的提高蛋白含量的能力，和熱帶假絲酵母復配后，可以利用菜粕中加入的無機氮合成自身的菌體蛋白。所以兩株霉菌和一株酵母的復配菌系不僅很好的降低了菜粕中硫甙含量，而且在一定程度上降低了粗纖維的含量、提高了蛋白含量(單寧和植酸含量基本無影響)，大大提高了菜粕的飼用價值。?

發明內容

本發明的目的是提供一種能降解硫代葡萄糖甙的復合菌系，以及在降解菜粕中的硫甙、粗纖維和提高蛋白質含量中的應用。?

為了實現以上目的，本發明所采用的技術方案為：?

本發明提供的一種微生物復配菌系，是由兩株霉菌和一株熱帶假絲酵母構成，兩株霉菌是從腐爛的菜籽粕中分離純化得到了，一株熱帶假絲酵母(Candidatropicalis)由江南大學食品學院谷物功能成分研究室提供，兩株霉菌由生工生物工程(上海)有限公司鑒定，鑒定結果為橫梗霉屬(Lichtheimia?sp.)和土曲霉(Aspergillus?terreus)，橫梗霉屬(Lichtheimia?sp.JN3C)已于2010年5月13日保臧于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為：CCTCC?M2010114。?

本發明的霉菌取材于腐爛的菜籽粕樣品，實驗初期只以硫甙降解率為指標進行菌種的篩選，即通過初篩、復篩、發酵培養基硫甙降解率測定和復配菌株的篩選等實驗最終確定了土曲霉和橫梗霉屬兩株霉菌。以選出兩株霉菌作為基礎和熱帶假絲酵母進行復配。?

在15g的菜籽粕中加入3％的(NH₄)₂SO₄作無機氮源和1％的葡萄糖，并選擇發酵溫度30℃，料水比1∶1.3，發酵時間70h的條件下，用5ml無菌水沖洗試管斜面制備菌懸液后，以0.6ml∶0.8ml∶1.0ml(土曲霉∶橫梗霉屬∶熱帶假絲酵母)為配比進行固態發酵。?

以上條件進行固態發酵后，硫甙的降解率達90％以上，蛋白含量從38.01％(干基)提高到48.47％，粗纖維的含量由14.5％(干基)降低到2.78％，單寧和植酸含量略有降低。顯著的改善了菜粕的飼用品質。?

附圖說明

圖1為橫梗霉屬(Lichtheimia?sp.JN3C)和土曲霉(Aspergillus?terreus)平板培養菌落圖片。?

圖2為硫甙的降解率隨時間的變化曲線。?

圖3為發酵前后蛋白質和粗纖維的變化圖。?

具體實施方式

實施例1：菌株的篩選?

1培養基?

基礎培養基：用菜粕餅粕按1∶6(g/ml)加90℃左右的水，沸水浴加熱30min，冷卻后過濾，取濾液為基礎培養基。?

分離細菌培養基：基礎培養基中加入牛肉膏0.05％，蛋白胨0.15％，NaCl?0.5％，瓊脂2％，0.15％納它霉素，PH7.0-7.2。?