[發明專利]一種天然麥角甾苷的分離純化方法

有效

• 申請號: 201010183281.0
• 申請日: 2010-05-18
• 公開（公告）號: CN101838299A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發明（設計）人: 陳新;聶晗
• 申請（專利權）人: 武漢工業學院;武漢歐亞神達生物科技有限公司
• 主分類號: C07H15/18
• 分類號: C07H15/18;C07H1/08
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 馬輝;潘杰

1.一種天然麥角甾苷的分離純化方法，它包括以下步驟：

(1)、將中藥密蒙花用乙醇水溶液進行提取，然后將密蒙花提取液進行濃縮至干品，即為麥角甾苷粗提物；

(2)、將麥角甾苷粗提物用甲醇溶解，然后通過裝有硅膠的層析柱，進行梯度洗脫，收集麥角甾苷洗脫物；

(3)、將上述洗脫物減壓濃縮至干品，得到麥角甾苷粗品；

(4)、將麥角甾苷粗品用水稀釋成澄清液，過濾，濾液通過裝行聚酰胺的層析柱吸附；達飽和吸附時停止上樣，用去離子水洗脫雜質，然后用質量百分數20-30％和35-80％醇水溶液分別進行解析，解析體積分別為2-4BV、1-8BV，收集35-80％醇洗脫物，減壓濃縮至無醇味，得到聚酰胺的層析洗脫物；

(5)、將聚酰胺的層析洗脫物通過裝有大孔樹脂的層析柱吸附；達飽和吸附時停止上樣，用去離子水洗脫雜質，然后用質量百分數20-30％，35-80％的醇進行解析，解析體積分別為1-3BV、3-8BV，收集35-80％的醇洗脫物，得到大孔樹脂的層析洗脫物；

(6)、將大孔樹脂的層析洗脫物濃縮至干品，得到高純度麥角甾苷。

2.根據權利要求1所述的一種天然麥角甾苷的分離純化方法，其中步驟(1)是將中藥密蒙花在溫度50-65℃的條件下用乙醇水溶液進行提取，乙醇水溶液的質量百分數為60-95％，密蒙花與乙醇水溶液質量比為1∶5-1∶20，提取2-4次，每次提取時間1-4h，合并提取液，在真空條件下，將密蒙花提取液進行濃縮至干品。

3.根據權利要求1所述的一種天然麥角甾苷的分離純化方法，其中步驟(2)是將麥角甾苷粗提物用甲醇溶解為1mg/ml，按硅膠∶樣品的質量比為1∶1-4∶1拌樣，通過裝有層析用硅膠的層析柱，用質量比乙酸乙酯∶甲醇∶水為20-5∶1∶0.05進行梯度洗脫，控制洗脫流速為1BV/h，收集麥角甾苷洗脫物。

4.根據權利要求1所述的一種天然麥角甾苷的分離純化方法，其中步驟(2)是將麥角甾苷粗提物用甲醇溶解為1mg/ml，按硅膠∶樣品的質量比為1∶1-4∶1拌樣，通過裝有層析用硅膠的層析柱，用質量比氯仿∶甲醇∶水為6-1∶1∶0.05進行梯度洗脫，控制洗脫流速為1BV/h，收集麥角甾苷洗脫物。

5.根據權利要求1所述的一種天然麥角甾苷的分離純化方法，其中步驟(3)是將麥角甾苷洗脫物在真空度為0.05-0.1MPa溫度為50～80℃條件下減壓濃縮至干，得到麥角甾苷粗品。

6.根據權利要求1所述的一種天然麥角甾苷的分離純化方法，其中步驟(4)是將麥角甾苷粗品用水稀釋成澄清液，過濾，濾液以上樣流速為0.5-3.0BV/h通過裝有聚酰胺的層析柱吸附；達飽和吸附時停止上樣，用1-3倍柱床體積的去離子水洗脫雜質，然后用質量百分數20-30％和35-80％醇水溶液進行解析，解析體積分別為2-4BV、3-8BV，將35-80％醇洗脫物，減壓濃縮至無醇味，得到聚酰胺的層析洗脫物。

7.根據權利要求1所述的一種天然麥角甾苷的分離純化方法，其中步驟(5)是將聚酰胺的層析洗脫物以上樣流速為0.5-3.0BV/h通過裝有大孔樹脂的層析柱吸附；達飽和吸附時停止上樣，用1-3倍柱床體積的去離子水洗脫雜質，然后用質量百分數20-30％，35-80％的醇進行解析，解析體積分別為1-3BV、3-8BV，收集35-80％的醇洗脫物，得到大孔樹脂的層析洗脫物。

8.根據權利要求1所述的一種天然麥角甾苷的分離純化方法，其中大孔樹脂分離純化時所用薄層層析板為硅膠G板，展開劑的質量比為氯仿∶甲醇∶水＝3.5∶1∶0.05。

9.根據權利要求1所述的一種天然麥角甾苷的分離純化方法，其中在聚酰胺分離純化和大孔樹脂分離純化中，所述的醇為甲醇或乙醇。