[發明專利]用于治療手足口病的抗病毒口服液的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201010183008.8
• 申請日: 2010-05-20
• 公開（公告）號: CN101843884A
• 公開（公告）日: 2010-09-29
• 發明（設計）人: 康志英;蔡春玲;黃潔文;張余霞;李小妹
• 申請（專利權）人: 廣州市香雪制藥股份有限公司
• 主分類號: A61K36/9066
• 分類號: A61K36/9066;A61K9/00;A61P31/14;G01N30/02;G01N30/36;G01N30/06;A61K33/06
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技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，涉及一種中成藥的質量檢測方法，具體是一種用于治療手足口病的抗病毒口服液的質量檢測方法。

背景技術

抗病毒口服液收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準新藥轉正標準第二冊》WS₃-(X-39)-92(z)，(中華人民共和國衛生部藥典委員會編、1992年出版)。目前已載入2010年版藥典一部(2010年10月1日正式執行)。產品為復方制劑，它是由板藍根129g、石膏57g、蘆根61g、地黃32g、郁金25g、知母25g、石菖蒲25g、廣藿香29g、連翹46g的水提取物加藥用輔料和水制成1000ml的抗病毒口服液。具有清熱祛濕，涼血解毒之功效，用于風熱感冒，溫病發熱及上呼吸道感染，流感、腮腺炎等病毒感染疾患。臨床上用于風熱感冒、溫病發熱引起的上呼吸道感染、流感及流行性腮腺炎等病毒感染性疾患，具有較好的療效。

手足口病又稱手足口綜合征，是由腸道病毒引起的急性發疹傳染病，臨床上急性起病、發熱，以口腔黏膜和手足皮膚發生皰疹為特征。根據其癥狀和特征，在中醫學中手足口病當屬“時疫”、“溫病”等范疇。從本公司的臨床研究結果來看，發現本公司的抗病毒口服液對手足口病有輔助治療作用。由于復方中成藥是由多味藥材提取而成，其有效成分復雜，有效成分的含量更是與藥材的產地、采集時間、保存質量，藥材的提取方法和工藝控制條件等多種因素有關，如板藍根是該藥物處方中的君藥，其藥材的質量與提取的活性成分的量有密切關系，板藍根有南板藍根和北板藍根，其所含的有效成分又不同。北板藍根來源于十字花科植物菘蘭，含抗病毒的特征性成分(R，S)-告依春(又稱表告依春)。南板藍根來源于爵床科植物馬藍，不含(R，S)-告依春，其抗病毒的藥理活性遠低于北板藍根。連翹根據其采收期不同，可分為青翹和老翹兩種，但均為連翹。果實初熟尚帶綠色時采收，用沸水煮片刻或蒸熟后曬干，習稱“青翹”；果實熟透時采收曬干，習稱“老翹”。近年來的研究表明，青翹中總黃酮、連翹苷含量都高于老翹，且老翹中連翹苷含量低。

抗病毒口服液目前生產企業眾多，導致產品質量魚龍混雜，甚至有的企業產品不按標準要求投料，則產品的質量就更無法保證在臨床上有對手足口病的治療效果。

板藍根為抗病毒口服液處方中的君藥，在方中用量最大，其抗病毒的藥理活性明顯。但目前標準并未建立其含量測定指標。據文獻“藍根化學成分及其藥理活性研究進展，齊齊哈爾醫學院學報2008年第29卷第13期，1609頁”，報道了板藍根對柯薩奇B3病毒、腎綜合征出血熱病毒、乙型腦炎病毒、腮腺炎病毒、單純皰疹病毒以及乙型肝炎病毒均有抑制作用。文獻“連翹化學成分和生物活性研究.西北大學；中藥學(專業)碩士論文2008年度”報道了：連翹提取物有抗柯薩奇B病毒及埃柯病毒的作用。雞胚體外實驗證明連翹對亞洲甲型流感病毒、鼻病毒17型等也有抵制作用。實驗表明連翹苷、連翹酯苷有較強的體外抵制病毒作用。

據本發明人的研究，抗病毒口服液中(R，S)-告依春、連翹苷、連翹酯苷、連翹酯素四個成分含量的高低，會直接影響抗病毒口服液對治療手足口病的療效，所以對用于治療手足口病的抗病毒口服液必需建立一種質量測定的方法來控制產品的專利，保證臨床的療效。因此，迫切需要一種簡便的質量檢測方法能同時定性和定量測定抗病毒口服液中(R，S)-告依春、連翹苷、連翹酯苷、連翹酯素四個成分。

發明內容

本發明的目的在于通過抗病毒口服液中四個主要活性成分(R，S)-告依春、連翹苷、連翹酯苷、連翹酯素的定性、定量分析，提供一種用于治療手足口病的抗病毒口服液的質量檢測方法。

本發明所說的抗病毒口服液為由藥材板藍根129g、石膏57g、蘆根61g、地黃32g、郁金25g、知母25g、石菖蒲25g、廣藿香29g、連翹46g的水提取物加藥用輔料和水制成1000ml的抗病毒口服液，

其質量測定方法是用高效液相色譜一測多評的方法測定，10ml的抗病毒口服液中含(R，S)-告依春(即表告依春)不得低于60μg，含連翹酯苷A不得低于1mg，含連翹苷不得低于0.25mg，含連翹酯素不得低于0.12mg。

高效液相色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；洗脫是以乙腈為流動相A，用磷酸調PH值至2.7～2.9的水為流動相B組成的梯度洗脫液進行梯度洗脫，檢測波長為236nm，理論板數按(R，S)-告依春峰計算，不得低于20000。

所說的高效液相色譜一測多評法包括如下步驟：