[發明專利]一種從生物體中提取GP4G的方法

有效

• 申請號: 201010181956.8
• 申請日: 2010-05-25
• 公開（公告）號: CN101857623A
• 公開（公告）日: 2010-10-13
• 發明（設計）人: 鄭春陽;魏國祥
• 申請（專利權）人: 天津強微特生物科技有限公司
• 主分類號: C07H19/20
• 分類號: C07H19/20;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種提取生物體中活性物質的方法，特別涉及一種從生物體中提取GP4G(四磷酸二鳥苷)的方法。

背景技術

GP4G(P¹，P⁴-Di(guanosine?5′)tetraphosphate)，化學名為四磷酸二鳥苷，在化妝界被稱為細胞活化再生素，能滲透至真皮層，具有活化肌膚，幫助修復受損細胞，加強細胞的再生功能，讓細胞之間的養分疏通效率更高；促進膠原蛋白成分合成，提升細胞整體活力，延緩皺紋產生，改善和淡化皺紋，幫助肌膚恢復緊致與彈性。在化妝品行業具有廣闊的市場前景。

目前有報道的關于GP4G的提取方法見于F.J.FINAMORE和A.H.WARNER于1963年在The?Journal?of?Biological?Chemistry發表的文章The?occurrence?of?P¹，P⁴-Diguanosine?5′-Tetraphosphate?inBrine?shrimp?eggs。但是根據此文獻報道的提取GP4G的方法，其GP4G的收率低，設備要求條件高，生產成本高，不利于工業化生產。

發明內容

鑒于此，本發明的目的是提供一種從生物體中提取GP4G的方法，與文獻中方法相比，具有收率高、生產成本低，有利于工業化生產的特點。

本發明采用以下的技術方案：用含有GP4G的生物材料作為原材料，進行以下步驟的操作：

原料預處理：稱取1000kg～2000kg生物原材料，用100～200目的篩網進行篩選，去除雜物，再進行清洗；

脫水：將處理后的生物原材料放置到設有100～200目篩網的傳送機上進行脫水，并以0.5m/min～2m/min的速度傳送；

破碎：將脫水后的生物原材料進行破碎；

浸?。簩⑵扑楹蟮纳镌牧系恼奂兏芍嘏c1mol/L～3mol/L的-10℃～20℃的酸性溶液按1∶1～10kg∶L的比例混合，充分攪拌30min～120min，分離上清液；

中和：真空濃縮1～10倍后，用2mol/L～5mol/L堿性溶液調整浸取后的上清液pH至7～8，收集固體析出物，去除清液，將固體析出物按5％～30％濃度采用蒸餾水或去離子水溶解，再采用2mol/L～5mol/L酸性溶液調清液pH至2～5，準備上柱；

吸附：上述溶液用強酸性陽離子交換樹脂進行吸附，吸附飽和后，注入脫鹽水或去離子水進行壓料；

洗脫：用0.5mol/L～2mol/L的酸性洗脫劑進行洗脫解吸，并分段收集目標產物；

脫鹽：然后采用弱堿性陰離子交換樹脂進行過流工藝脫色脫鹽處理；

真空濃縮：在操作壓力為-0.085MPa～-0.092MPa，溫度為30℃～60℃的真空狀態下，當溶液中GP4G的含量達到6％時，開始收集GP4G。

所述含有GP4G的生物材料為含高鹽及含高礦物或耐高鹽的海洋浮游生物及內陸湖里的殼類生物。優選為含高鹽及含高礦物或耐高鹽的鹵蟲或鹵蟲卵。

所述浸取步驟中用到的酸性溶液為HCl，HClO₄，H₂SO₄，HNO₃，HCOOH，CH₃COOH中的一種或幾種。

所述浸取步驟中上清液的分離方法為虹吸、離心、過濾中的一種或幾種方式。

所述中和步驟中所用到的堿性溶液為NaOH，KOH，氨水中的一種或幾種。

所述洗脫步驟中的酸性洗脫劑為甲酸、乙酸、HCl、H₂SO₄中的一種或幾種。

所述最終獲得的GP4G產物為液態或固態，優選為液態。

在實際操作中，浸取過程中用到的酸性溶液中經常加入NaCl，(NH₄)₂SO₄，KCl等鹽類用來加強浸取的效果；在第一次將上清液浸取完畢后，還有一些固體不溶物剩余，將這些固體不溶物和酸性溶液按1∶1～10的比例進行二次、三次浸取，后兩次浸取液可依次作為下一批次的第一次、第二次浸取液進行使用，這樣操作的好處可以降低溶劑用量和廢水量，同時可以提高浸提收率和節省浸提時間。再將剩余的固體不溶物用板框過濾機，操作壓力為10MPa～20MPa進行過濾處理，收集上清液，濾渣用于其他用途。

得到真空濃縮的GP4G后，可按最終產品不同的規格要求，分別作后續加工。