[發(fā)明專利]一種具有雙重功效的體外診斷試劑盒防腐劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010181510.5
• 申請日: 2010-05-25
• 公開（公告）號: CN101849559A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發(fā)明（設計）人: 尹鵬;安東輝
• 申請（專利權）人: 浙江康特生物科技有限公司
• 主分類號: A01N65/42
• 分類號: A01N65/42;A01P1/00;G01N33/53;C12Q1/52
• 代理公司: 浙江翔隆專利事務所 33206
• 代理人: 張建青

技術領域

本發(fā)明涉及醫(yī)學體外診斷領域，具體地說是一種具有雙重功效的體外診斷試劑盒防腐劑。

背景技術

防腐劑是體外診斷試劑盒必不可缺少的成份，它能防止試劑盒因微生物的生長引起的腐敗變質，使試劑盒在規(guī)定的環(huán)境中具有一定的有效性。目前國內(nèi)外試劑盒大多數(shù)采用化學劑，而采用的這些防腐劑中大部分都具有毒性，部分具有腐蝕性，對使用者及環(huán)境都潛在很大的危險性及污染。

現(xiàn)有診斷試劑盒中常用的防腐劑有硫柳汞、疊氮鈉、抗生素等。

硫柳汞在ELISA(酶聯(lián)免疫反應)試劑中曾普遍使用，但因其有毒，現(xiàn)較少或幾乎不使用。市面許多試劑盒產(chǎn)品，用抗生素(如慶大霉素)做防腐劑較多，較疊氮鈉試劑毒性作用小，但試驗過程中發(fā)現(xiàn)抗生素類藥物根據(jù)其化學結構有著不同的抗菌譜，抗菌譜最廣的也僅僅限于大部分的原核微生物，無法對全部微生物起效。因此，抗生素只是可以對抗細菌，但是不能對抗除細菌外的其它微生物，且長時間不能達到完全防腐的作用。

疊氮鈉是目前體外診斷試劑盒最常用的防腐劑，雖然其防腐效果尚好，但其對過氧化特酶、抗體的活性都有一定的抑制作用。此外，疊氮鈉已納入2008年的劇毒化學品來管理。疊氮鈉和氰化物相似，對細胞色素氧化酶和其它酶有抑制作用，并能使體內(nèi)氧合血紅蛋白形成受阻，有顯著的降壓作用。對眼和皮膚有刺激性，如吸入、口服或經(jīng)皮膚吸收，可引起中毒死亡；同時，受熱、接觸明火、或受到摩擦、震動、撞擊時可發(fā)生爆炸。疊氮鈉與酸類劇烈反應會產(chǎn)生爆炸性的疊氮酸，與重金屬及其鹽類會形成十分敏感的化合物。可見疊氮鈉雖然為試劑盒最常用的防腐劑，但在使用過程中對人體、環(huán)境潛在著較大的危險性。

ProClin系列防腐劑是SUPELCO公司推出新一代高效生物防腐劑，可以有效地控制體外診斷試劑中微生物的生長。當濃度達到0.02％條件下，ProClina系列防腐劑具有廣譜抗菌活性，能在比較長的時間內(nèi)抑制細菌、真菌和酵母菌等微生物的生長；同時，它又能保持體系中酶的活性，因此它是一種理想的可替代硫汞撒、疊氮化鈉和慶大霉素等物質的生物防腐劑，但因其價格昂貴，現(xiàn)在只少量用于臨床研究。因此，目前尋找一種價格合適、有效且無毒害作用的試劑盒防腐劑是非常必要的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種價格合適、無毒性、無腐蝕性、對使用者及環(huán)境均無潛在危險且能夠提升體外診斷試劑盒性能指標的防腐劑。

為此，本發(fā)明采用如下的技術方案：一種具有雙重功效的體外診斷試劑盒防腐劑，其特征在于所述的防腐劑采用蒜汁，其用量為體外診斷試劑盒中試劑體積總量的0.5％-6.0％，最優(yōu)選為0.5％-3.5％。

蒜汁有效成分大蒜素的分子式為：C₆H₁₀OS₂，具有抗念球菌屬菌、隱球菌屬菌和須發(fā)癬菌等抗菌作用，是一種殺菌效果很理想的廣殺菌劑，其作用原理為：大蒜素獨特的分子結構使它具有濃烈的大蒜氣味。大蒜素的殺菌作用主要是因為其中的二烯丙基硫醚具有獨特的生物活性。烯丙基是共軛結構基團，它的電負性較高，可部分地給毗鄰的硫原子提供電子，使硫的缺電子性減小，活性增大，且能產(chǎn)生一定量的具生物活性的含硫基團，而許多含硫基團是已知的有效殺菌劑，能破壞細菌的蛋白質合成等生理過程。蒜汁的主要特點就是抗菌廣譜，抑菌力強，且對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌、霉菌都具有極強的殺滅作用，可有效地抑制試劑盒中細菌的生長。

上述的體外診斷試劑盒防腐劑，蒜汁由大蒜中提取，其采用浸泡提取法，其過程如下：取新鮮大蒜，去皮搗碎成糊狀，所得的蒜泥加入乙醇溶液，密封放置10-20天，離心去渣，濾液抽濾，將濾液減壓蒸餾去除乙醇即可。

本發(fā)明對防腐劑的用量確定過程如下：蒜汁與試劑的比例按0.5％、1％、1.5％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％配制了11個試劑盒(以視黃醇結合蛋白測定試劑盒為例)，防腐劑的用量不影響試劑盒的有效成份及性能指標作為前提，結果如下表：

上述實驗數(shù)據(jù)表明，蒜汁的用量在0.5％-6.0％范圍內(nèi)，RBP測定試劑盒的各項技術指標均在可接受范圍內(nèi)，但在0.5％-3.5％范圍內(nèi)各項指標測定結果為最理想狀態(tài)。

本發(fā)明對防腐效果的確定如下：

因為在0.5％-3.5％范圍內(nèi)各項指標測定結果為最理想狀態(tài)，所以配制含蒜汁0.5％、1.0％、1.5％、2.5％、3.0％、3.5％系列濃度的RBP測定試劑盒，效期后12個月，觀察試劑盒的技術指標，直至效期后13個月，結果如下：