[發(fā)明專利]一種整體柱固相萃取樣品前處理方法

無效

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• 申請日: 2010-05-18
• 公開（公告）號: CN101858898A
• 公開（公告）日: 2010-10-13
• 發(fā)明（設計）人: 徐暉;閆志華;王淑余;辜艷琴;梁璐
• 申請（專利權）人: 華中師范大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/60;G01N30/02
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 張安國

技術領域

本發(fā)明涉及一種分析樣品前處理用的整體柱固相萃取方法。

背景技術

復雜基質中物質分析監(jiān)測，一直被分析工作者所關注。一般所采用的檢測方法有液相微萃取(LLE)、液膜萃取(LMP)、固相微萃取(SPME)、固相萃取(SPE)等。相對于液相萃取和SPE，SPME技術是一種較新的綠色樣品前處理方法，該方法于1990年由Arthur和Pwahsyzn首次提出，它集采樣、富集、進樣于一體并且使用有機溶劑少，因此被廣泛應用。固相微萃取包括固定相外露式和管內固相微萃取兩種。近年來，分析工作者從分離介質本身著手，開發(fā)出新一代分離介質——整體柱，并將其廣泛應用于固相微萃取。

整體柱是由單體、引發(fā)劑、致孔劑等混合物通過原位聚合的方法制備而成的棒狀整體。它具有合成過程簡單、操作方便、整體結構穩(wěn)定等特點。它所具有雙孔結構(微米級的通孔和納米級的中間孔，使得它本身具有高萃取效率和良好的滲透性。實際上，它吸取了無孔填料和膜的快速分離能力，又沒有增加阻力，被譽為第四代分離介質。

整體柱按照制備單體的不同可以分為：有機聚合物整體柱、硅膠整體柱和顆粒固定化整體柱。有機聚合物整體柱可供合成的單體種類多，聚合形成的不同整體柱可實現多種物質的分析，且具有生物相容性和寬的pH范圍，可作為多種模式的色譜固定相。整體柱材料具有制備簡單、無需柱塞等特點，因而將其合成在使用毛細管和PEEK管中作為分離介質，成為人們研究的熱點。但是，在使用中，這種方法也存在以下問題：

(1)毛細管(0.10～0.53毫米)、PEEK管(微米級)內徑小，萃取容量不大，限制富集倍數的進一步提高和檢測限的進一步降低，使得靈敏度不高。

(2)毛細管使用時萃取流速低(一般為0.04mL/min)，影響樣品分析速度。

(3)由于整體柱內徑小且柱長較長(1-3厘米)，溶液通過時，背壓很大，影響分析速度和實際應用價值。

發(fā)明內容

本發(fā)明就是針對上述不足，對毛細管整體柱固相微萃取方法進行改進，提供了一種簡單、易操作、重現性較好、靈敏度較高的基于整體柱的固相萃取方法。

固相萃取所使用的基質是聚丙烯材質的篩板，其直徑為4.8毫米，且本身具有20微米左右的孔隙，將液體狀的聚合物充滿其中，使用光引發(fā)進行原位合成，將整體柱材料合成在空隙中，一方面使得被負載的聚合物體積增大，也就是萃取容量增大；另一方面，由于篩板很薄，在增大萃取容量和萃取效率的同時，大大降低了萃取柱的背壓。材料合成簡單、萃取快速、高效，在實際樣品分析中具有較強的應用價值。

本專利的技術方案如下：

一種整體柱固相萃取樣品前處理方法，其步驟包括：

1)、取一個1毫升注射器，一個篩板，篩板直徑為4.8毫米，厚度1.6毫米，具有微米級的孔隙；

2)、將整體柱的材料合成在篩板上，然后將篩板塞入1毫升注射器內作固定相，從注射器尾端注入待萃取樣品溶液作液相，并推出此溶液，由篩板上的整體柱材料對樣品溶液中的目標分析物進行富集；

3)、用解析液將整體柱篩板上富集的目標分析物解析作高效液相色譜分離檢測。

所述的整體柱的材料合成在篩板上，是將配置好的整體柱的前驅體溶液滴在篩板上，通過原位反應使整體柱材料合成在篩板上。

根據目標分析物選取制備整體柱的聚合物單體。

測定血清中的醛類化合物的整體柱材料的合成步驟：配置由0.024g的單體甲基丙烯酸，0.43g的交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯，0.05g的光引發(fā)劑1-羥基環(huán)己基苯基甲酮，以及二元致孔劑甲苯0.093g，十二醇0.43g混勻超聲得到的前驅體溶液，將其滴加在篩板上，在紫外燈下進行光引發(fā)原位聚合反應使整體柱材料合成在篩板上。

所述的光是高壓汞燈光。

所述的篩板采用聚丙烯篩板，篩板直徑為4.8毫米，厚度1.6毫米，具有20微米的孔隙。

本整體柱固相萃取方法的優(yōu)點：

1、利用篩板作為介質進行整體柱原位合成，材料合成方法簡單；

2、與直徑530微米、2厘米長的毛細管柱相比，直徑4.8毫米的篩板的有效體積約是前者的4.4倍，增大了萃取容量，提高了分析靈敏度；

3、由于篩板很薄，厚度只有1.6毫米，萃取柱的背壓大大降低，同時萃取時間有效地縮短；

4、由于篩板、一次性注射器等物品便宜，并可借用常規(guī)固相萃取的裝置進行實驗，無需添置微量注射泵等設備，大大降低了實驗成本，提高了其實際應用價值。