[發明專利]一種抗菌肽plectasin的高效生產方法及應用無效
| 申請號: | 201010181259.2 | 申請日: | 2010-05-18 |
| 公開(公告)號: | CN101870986A | 公開(公告)日: | 2010-10-27 |
| 發明(設計)人: | 黃毓茂;劉德輝;何俊 | 申請(專利權)人: | 華南農業大學 |
| 主分類號: | C12N15/81 | 分類號: | C12N15/81;C12N1/19;C07K14/47;A61K38/16;A61P31/04;A23K1/16;A23L3/3526 |
| 代理公司: | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人: | 林麗明 |
| 地址: | 510642 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 抗菌 plectasin 高效 生產 方法 應用 | ||
1.一種抗菌肽plectasin的高效生產方法,其特征在于通過構建pGAPZαA-plectasin真核表達載體轉化宿主細胞畢赤酵母,構建表達工程菌,發酵培養表達工程菌后將表達培養基離心處理得到的上清液即純化得到抗菌肽plectasin。
2.根據權利要求1所述抗菌肽plectasin的高效生產方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)將編碼plectasin的DNA序列克隆到載體pGAPZαA上,構建pGAPZαA-plectasin重組表達載體;
(2)將重組表達載體pGAPZαA-plectasin轉化宿主細胞畢赤酵母SMD1168,構建重組酵母基因工程菌;
(3)發酵培養重組酵母菌,進行表達;
(4)將表達培養基離心處理,取上清液即得純化的抗菌肽plectasin。
3.根據權利要求2所述抗菌肽plectasin的高效生產方法,其特征在于步驟(3)是將篩選的具有Zeocin抗性的單菌落于的YPD液體培養基中進行一級培養,至OD600=2~6,此時細胞處于對數生長期;取一級培養液,重懸于YPD中,繼續振蕩培養72~120小時。
4.根據權利要求2所述抗菌肽plectasin的高效生產方法,其特征在于步驟(4)是將表達培養基于3000~5000r/min下離心,取上清液即為純化得到的抗菌肽plectasin。
5.一種權利要求1所述方法制備得到的抗菌肽plectasin的應用,其特征在于應用于制備抗金黃色葡萄球菌或豬源鏈球菌藥物方面。
6.一種權利要求1所述方法制備得到的抗菌肽plectasin的應用,其特征在于應用于制備飼料添加劑或防腐劑。
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