[發(fā)明專利]檢測SLC26A4基因c.2006A＞T突變的試劑盒

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010180609.3
• 申請日: 2010-05-21
• 公開（公告）號: CN101838699A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭玉芬;王艷莉
• 申請（專利權(quán)）人: 蘭州大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司 62002
• 代理人: 李艷華

1.一種檢測SLC26A4基因c.2006A＞T突變的試劑盒，包括

——針對SLC26A4基因或SLC26A4基因編碼區(qū)第2006位堿基附近設(shè)計的PCR引物；

——PCR反應(yīng)試劑；

——檢測PCR擴增產(chǎn)物的試劑。

2.如權(quán)利要求1所述的檢測SLC26A4基因c.2006A＞T突變的試劑盒，其特征在于：所述PCR引物為15～30個堿基，GC含量為45～50％。

3.如權(quán)利要求2所述的檢測SLC26A4基因c.2006A＞T突變的試劑盒，其特征在于：所述PCR引物中

上游引物為SLC26A4-17F：5’-TCTTCGTTTAGAATGGCATCA-3’

下游引物為SLC26A4-17R：5’-ATTGCCAAAGCTCCAAATGT-3’。

4.如權(quán)利要求1所述的檢測SLC26A4基因c.2006A＞T突變的試劑盒，其特征在于：所述PCR反應(yīng)試劑為2.5μl、含15ml?MgCl₂的10×PCR緩沖液，2.0μl、2.5mM的dNTP，0.3μl、5U/μl的耐熱聚合酶，0.25μl熒光染料。

5.如權(quán)利要求1所述的檢測SLC26A4基因c.2006A＞T突變的試劑盒，其特征在于：所述檢測PCR擴增產(chǎn)物的試劑為測序檢測試劑、限制性內(nèi)切酶酶切檢測試劑、限制性長度多態(tài)性檢測試劑、序列特異性引物檢測試劑或雜交探針檢測試劑中的任意一種。

6.如權(quán)利要求1所述的檢測SLC26A4基因c.2006A＞T突變的試劑盒在檢測前庭導(dǎo)水管擴大相關(guān)的位于SLC26A4基因的2006位突變中的應(yīng)用，包括以下步驟：

(1)采集待測個體的血液、體液或組織樣本，提取基因組DNA；

(2)以所述DNA為模板，采用所述PCR引物進行PCR反應(yīng)，得到PCR擴增產(chǎn)物：

SLC26A4-17F：5’-TCTTCGTTTAGAATGGCATCA-3’

SLC26A4-17R：5’-ATTGCCAAAGCTCCAAATGT-3’；

(3)將所述PCR擴增產(chǎn)物純化后進行直接測序，并將測序結(jié)果與SLC26A4基因標(biāo)準(zhǔn)序列進行比較，確定是否存在SLC26A4基因的c.2006A＞T突變位點；

(4)判斷待測個體是否為SLC26A4基因突變c.2006A＞T導(dǎo)致的前庭導(dǎo)水管擴大。

7.如權(quán)利要求6所述的檢測SLC26A4基因c.2006A＞T突變的試劑盒在檢測前庭導(dǎo)水管擴大相關(guān)的位于SLC26A4基因的2006位突變中的應(yīng)用，其特征在于：該應(yīng)用還包括按照正常閱讀框架進行翻譯以確定c.2006A＞T突變，使得位于Pendrin羧基端的第669位氨基酸由天冬氨酸變?yōu)槔i氨酸。