[發明專利]富營養化水體中浮游植物葉綠素a的分析測定方法

無效

• 申請號: 201010176060.0
• 申請日: 2010-05-14
• 公開（公告）號: CN101858857A
• 公開（公告）日: 2010-10-13
• 發明（設計）人: 周雪飛;黃麗;龔本濤;張亞雷
• 申請（專利權）人: 同濟大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/34
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 吳林松

1.富營養化水體中浮游植物葉綠素a的分析測定方法，具體步驟如下：

(1)樣品的前處理：按照傳統的檢測水體中浮游植物的葉綠素的取樣方法采集水樣，將200～500ml的水樣通過抽濾器抽濾，將抽濾后的濾膜以及附著于其上的浮游植物置于10～25mL具塞離心管中，然后放入-18℃冰箱中冷凍6～8小時；

(2)樣品的萃取：從冰箱取出步驟(1)的具塞離心管恢復至室溫狀態后，向離心管中加入10mL?80℃的90％乙醇，于80℃水浴2min后，于超聲波清洗機內超聲10min，然后避光靜置萃取3～5h后以4000r/min的轉速離心10min，取上清液待測；

(3)上清液的測定及水體中浮游植物葉綠素a的濃度計算：取步驟(2)所得上清液在分光光度計上測定上清液的葉綠素a的吸光度；首先以90％乙醇作空白吸光度測定，對上清液吸光度進行校正；而后開始測定上清液的吸光度，先在665nm波長測上清液吸光系數E₆₆₅，再在750nm波長測上清液吸光系數E₇₅₀，然后在裝有上清液的比色皿中加入0.1～0.2毫升1.0mol/L鹽酸進行酸化，加蓋搖勻，靜置1min后重新在665nm波長測定經過酸化處理后的上清液的吸光系數A₆₆₅，再在750nm波長測其吸光系數A₇₅₀，按下式計算水體中浮游植物葉綠素a的濃度：

Chla=27.9V1[(E665-E750)-(A665-A750)]V2]]>

式中：Chla——葉綠素a濃度(ug/L)；

V₁——乙醇萃取液定容后的體積(L)；

V₂——水樣的體積(L)；

E₆₆₅，A₆₆₅——665nm波長處的吸光系數；

E₇₅₀，A₇₅₀——750nm波長處的吸光系數。

2.根據權利要求1所述的分析測定方法，其特征在于：步驟(1)中采用的濾膜為直徑47mm、孔徑0.22μm的玻璃纖維濾膜，或國產直徑60mm、孔徑0.45μm的混合纖維濾膜，或直徑25mm、孔徑0.65μm的玻璃纖維濾膜。

3.根據權利要求1或2所述的分析測定方法，其特征在于：步驟(1)中采用的濾膜為直徑47mm、孔徑0.22μm的玻璃纖維濾膜。

4.根據權利要求1或2所述的分析測定方法，其特征在于：步驟(2)中超聲處理時的超聲波頻率為40kHz，功率為150W。