[發明專利]一種醛縮酶、編碼基因、載體、工程菌及其應用無效
| 申請號: | 201010175780.5 | 申請日: | 2010-05-19 |
| 公開(公告)號: | CN101921789A | 公開(公告)日: | 2010-12-22 |
| 發明(設計)人: | 謝恬;王秋巖;杜鵬飛;趙淑娟 | 申請(專利權)人: | 杭州師范大學 |
| 主分類號: | C12N15/60 | 分類號: | C12N15/60;C12N9/88;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21 |
| 代理公司: | 杭州天正專利事務所有限公司 33201 | 代理人: | 黃美娟;冷紅梅 |
| 地址: | 310036 浙江*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 醛縮酶 編碼 基因 載體 工程 及其 應用 | ||
(一)技術領域
本發明涉及一種醛縮酶,以及編碼該醛縮酶的基因、載體、工程菌及其應用。
(二)背景技術
醛縮酶作為催化碳碳原子立體成鍵的酶,可以廣泛的應用在有機化學合成中,它可以方便的以小分子為起點向大的復雜分子方向進行不對稱催化合成,這個過程在碳水化合物為底物的反應中意義尤為突出。應用酶的高區域選擇性,能夠容易避開對碳水化合物中的活潑的羥基的保護,更為突出的是在催化碳碳鍵合成的同時醛縮酶可以引入新的手性中心。正是這種能夠高效引入手性碳原子的能力,使得醛縮酶在藥物分子合成領域中有著廣泛的應用,與化學工藝相比,具有明顯優勢,如:避免了有毒有害物質的使用,合成可在常溫常壓條件下進行。從替代傳統化學合成工藝催化劑的角度,該酶催化的反應具有很強的綠色屬性,對傳統化學工藝的綠色化學改造有著重要意義,因而該酶具有廣闊的應用前景。
(三)發明內容
本發明的目的是提供一種新的、編碼基因、載體、工程菌及其應用。該新的醛縮酶與常規醛縮酶相比具有很好的耐高溫、耐有機溶劑的穩定性。
本發明采用的技術方案是:
一種來源于Aciduliprofundum?boonei的醛縮酶基因(DERA),具有SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列:
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aaggatggag?attatggatt?tgtggaaaga?gatataagag?aagttgttga?agcggtgcat??360
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ttcggcacag?cgggagcgaa?ggttgaggat?gttaaattga?tgcgcagtgt?ggttggcaat??540
gatatgggtg?taaaagctgc?tggcggaata?cataatgcaa?aggaggcaat?tgcaatgata??600
gaggcgggag?cgacaagaat?aggagctagc?agaagtgtgc?agattattga?aacgctggaa??660
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由于核苷酸序列的特殊性,任何SEQ?NO:1所示多核苷酸的變體,只要其與該多核苷酸具有90%以上同源性,均屬于本發明保護范圍之列。所述多核苷酸的變體是指一種具有一個或多個核苷酸改變的多核苷酸序列。此多核苷酸的變體可以使生的等位變異體或非生的變異體,包括取代變異體、缺失變異體和插入變異體。如本領域所知的,等位變異體是一個多核苷酸的替換形式,它可能是一個多個核苷酸的取代、缺失或插入,但不會從實質上改變其編碼的氨基酸的功能。
一種耐熱耐有機溶劑的醛縮酶,由所述醛縮酶基因編碼。具體的,所述醛縮酶具有SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列:
Met?Asn?Arg?Lys?Glu?Leu?Ala?Lys?Tyr?Ile?Asp?His?Thr?Asn?Leu?Lys
1???????????????5???????????????????10??????????????????15
Ala?Phe?Ala?Thr?Arg?Glu?Asp?Ile?Lys?Arg?Leu?Cys?Asp?Glu?Ala?Lys
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