[發明專利]一種膠體金標記的快速檢測條

無效

• 申請號: 201010175320.2
• 申請日: 2010-05-12
• 公開（公告）號: CN101871938A
• 公開（公告）日: 2010-10-27
• 發明（設計）人: 祝明
• 申請（專利權）人: 藍十字生物藥業（北京）有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 胡敬紅

技術領域

本發明涉及生物檢測，特別涉及一種膠體金標記的快速檢測試條。

背景技術

免疫膠體金技術(Immunogold?labelling?techique)是上世紀80年代繼熒光素、放射性同位素和酶三大標記技術后發展起來的固相標記免疫測定技術。該技術主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性，當這些標記物在相應的配體處大量聚集時，形成肉眼可見的紅色或粉紅色斑點，因而用于定性或半定量的快速免疫檢測方法中。該技術主要是將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在硝酸纖維膜上，膠體金結合墊為吸附或涂抹有膠體金標記試劑在玻璃纖維膜，當待測樣品加到試紙條一端的樣品墊上后，通過毛細作用向前移動到膠體金結合墊上并溶解膠體金結合墊上的膠體金標記試劑后相互反應，再移動至固定的抗原或抗體區域時，待測物金標試劑復合物與之發生特異性結合而被截留，膠體金標記聚集在檢測帶上，可通過目測得到直觀的顯色結果；而游離的標記物則越過檢測帶，從而達到與檢測物自動分離的目的。膠體金顆粒本身為紅色，不需要加入發色試劑，省卻了酶標的致癌性底物及終止液的步驟，對人體無毒害，金標記物比酶標記物更穩定，試驗結果可以長期保存而不腿色。免疫膠體金層析技術作為診斷試劑廣泛應用到臨床后，由于它的快速簡便、準確，具有高度特異性和高敏感性，結果直觀可靠，而且試劑和樣品用量極少，無需儀器設備，簡化了煩瑣的常規操作過程，同時也減小了因操作引起的誤差，是一種目前發展最快的復合型免疫層析技術。被認為是微生物和傳染病及寄生蟲病診斷技術標準化最有前途的新技術之一，并且可以進一步研發定量或半定量檢測試紙條以及通用檢測試紙條，因此該技術具有巨大的發展潛力和應用前景。

目前生產的膠體金檢測試紙條，是在條狀的一定長度的雙面膠帶一面上粘附著反應層，反應層依次由點樣區、膠體金結合區、檢測區、檢測物回收區組成；點樣區為玻璃纖維或硝酸纖維素膜；膠體金結合區鋪著一層固定有膠體金標記物的玻璃纖維；檢測區為硝酸纖維素膜，其上固定有檢測帶和質控帶；檢測物回收區通常為吸水性能較強的纖維材料，如粗纖維吸水膜，相連區域之間的膜材料有部分重疊，且膜材料從下層往上依次為檢測區、膠體金結合區、點樣區，有利于檢測物在膜材料之間泳動。制作時這些膜材料直接與雙面膠帶粘合，然后將雙面膠的另一面貼在一個與膠帶相同規格的塑料板上即得到檢測試紙條，在檢測過程中，當液態待檢物滴加到樣品吸收膜上，在毛吸作用下，待檢物泳動到膠體金墊上，溶解膠體金結合區域的膠體金標記試劑并相互反應生成復合物，在纖維膜的毛吸作用下，復合物向檢測區泳動，這個過程中，承載膠體金標試劑的玻璃纖維或其它膜材料與雙面膠之間的粘連界面會對膠體金標記試劑的泳動產生阻力，影響檢測速度，同時影響膠體金的化學穩定性，影響檢測的靈敏性，并導致試紙條的有效期縮短，對生產廠家造成經濟損失，而目前未見解決這一問題的文獻或生產報道。

發明內容

本發明根據上述領域的缺陷，提供一種膠體金標記的快速檢測試紙條。

一種膠體金標記的快速檢測試紙條，包括粘連在片狀載體材料上的反應層，所述反應層一端到另一端依次為相鄰接的點樣區、膠體金結合區、檢測區、回收區，所述點樣區鋪有玻璃纖維，所述膠體金結合區鋪有膠體金結合墊，所述檢測區鋪有硝酸纖維素膜，其特征在于：所述反應層還包括膠體金結合墊與片狀載體材料之間的一層無紡布。

所述膠體金結合墊為固定有膠體金標記試劑的一層無紡布。

所述膠體金結合墊表面到點樣區的玻璃纖維表面覆蓋有一層無紡布。

所述膠體金結合墊是將膠體金均勻涂抹于無紡布上。

所述無紡布密度：25-30g/m²，吸水性：60-70ml/m²，擴散性：瞬間擴散，釋放性：全部釋放

所述片狀載體材料為雙面膠。

所述雙面膠的另一面粘附于硬質防水載體板上。

本發明提供一種膠體金標記的檢測試紙條，通過在膠體金結合點墊與片狀載體材料之間加一層無紡布材料。待測樣品從點樣區泳動到膠體金標結合墊后與其上的膠體金標記試劑結合一起泳動到檢測區，由于膠體金結合墊與載體材料沒有直接粘連，粘連界面不會對膠體金標記標記復合物造成阻力，檢測物的泳動速度大大提高，有實驗數據證明，本發明的檢測試劑條對一般陽性樣品(約100mIU/ml)在20秒以內即可在檢測區讀出檢測結果，而其它現有檢測試紙條需要60-80秒才會顯示檢測結果，即泳動速度提高了3倍，見表1。

本發明還提供一種采用無紡布制作膠體金結合墊的檢測試劑條，通過對比試驗，發現，本發明的檢測試劑條上的膠體金標記試劑的穩定性較好。見表2