[發明專利]小麥幼胚培養結合標記選擇快速轉育抗赤霉病主效QTL的方法

有效

• 申請號: 201010175150.8
• 申請日: 2010-05-18
• 公開（公告）號: CN101828521A
• 公開（公告）日: 2010-09-15
• 發明（設計）人: 張鵬;馬鴻翔;姚金保;張旭;余桂紅;任麗娟;張平平
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04;A01H4/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 孫忠浩

1.一種小麥幼胚培養結合標記選擇快速轉育抗赤霉病主效QTL的方法，其特征在于：包括抗赤霉病回交轉育、幼胚壯苗培養、標記輔助選擇、快速成苗技術相結合的快速轉育抗赤霉病主效QTL，具體步驟如下：

a)以農藝性狀優良但感赤霉病小麥品種或品系為受體親本，以抗赤霉病小麥品種或品系為抗源父本，受體親本抽穗期去雄與抗源父本雜交后剝取幼胚；

b)4℃下春花培養7d后轉移到晝/夜25℃/15℃光照培養成苗，成苗5d后，移栽到晝/夜28℃/15℃溫室中生長，同時取半張葉片提取DNA，以SSR引物Xgwn493、Xgwm533為標記對DNA樣品進行PCR檢測，留取含有標記的植株繼續生長；

c)植株抽穗期去雄與回交親本進行雜交，所述的回交親本為感赤霉病小麥品種受體親本；

d)授粉后12d，在實驗室無菌操作下剝取幼胚；

e)按照b至d步驟輪回重復4～5次，最后一次輪回重復在b步驟結束后直接進入f；

f)揚花期自交，選育具有抗赤霉病主效QTL且農藝性狀優良的新種質。

2.根據權利要求1所述的小麥幼胚培養結合標記選擇快速轉育抗赤霉病主效QTL的方法，其特征在于：所述的剝取幼胚是指：花后12d的仔粒經75％酒精消毒30s和0.1％升汞消毒10～15min，無菌水洗3次；在無菌條件下將幼胚剝出；所述的春化培養是指：將幼胚尖端向下在添加0.3％麥芽提取物的1/2MS培養基中4℃培養7天。

3.根據權利要求2所述的小麥幼胚培養結合標記選擇快速轉育抗赤霉病主效QTL的方法，其特征在于：成苗5d后，移栽到晝/夜28℃/15℃溫室中生長是指：成苗5d后，將幼胚苗移栽到營養土中，遮蔭2～3d，緩苗后在晝夜溫度28℃/18℃溫室中培養，拔節期葉面噴每隔5d噴一次0.3％磷酸二氫鉀，連續噴施二次；所述的營養土由大田土、泥炭土和珍珠巖按照6∶3∶1的體積比混合而成。

4.根據權利要求1～3之一所述的小麥幼胚培養結合標記選擇快速轉育抗赤霉病主效QTL的方法，其特征在于：所述的農藝性狀優良但感赤霉病小麥品種或品系為揚麥15號或揚麥13或淮麥18；抗赤霉病小麥品種或品系為蘇麥3號或寧894037或寧7840。