[發(fā)明專利]一種煙葉浸提液培養(yǎng)基及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010173582.5
• 申請(qǐng)日: 2010-05-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101856143A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖敏;孟祥璟;盧麗麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類號(hào): A24B15/24
• 分類號(hào): A24B15/24;C12N1/20;C12R1/69;C12R1/38;C12R1/11;C12R1/01
• 代理公司: 濟(jì)南金迪知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37219
• 代理人: 趙會(huì)祥

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基，尤其涉及一種培養(yǎng)煙堿降解微生物的煙葉浸提液培養(yǎng)基及其應(yīng)用，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。

技術(shù)背景

煙堿是煙草中的生物堿，它對(duì)人的中樞神經(jīng)有強(qiáng)烈的刺激和麻痹作用，少量使人興奮，大量會(huì)引起眩暈、嘔吐甚至中毒死亡。煙葉中煙堿含量過(guò)高，就會(huì)嚴(yán)重危害煙民的健康。另外煙堿也是一種環(huán)境有毒物質(zhì)，在煙草制品的生產(chǎn)加工過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的固體、液體和氣體廢棄物，這些廢棄物如果不加處理就投放到環(huán)境中，會(huì)嚴(yán)重破壞生態(tài)環(huán)境，危害人類健康。微生物法降解煙堿因具有針對(duì)性、快速有效性的優(yōu)點(diǎn)，受到越來(lái)越多的重視。至今，國(guó)內(nèi)外研究者已經(jīng)從環(huán)境中分離了多種煙堿降解菌。

目前所報(bào)道的培養(yǎng)煙堿降解菌株的培養(yǎng)基成分復(fù)雜，例如添加Na₂HPO₄、KH₂PO₄、K₂SO₄、MgCl₂·6H₂O、MnCl₂·4H₂O、FeCl₃·6H₂O、CaCl₂等基礎(chǔ)離子成分后，再添加一定含量的煙堿，不僅制備繁瑣，而且煙堿價(jià)格昂貴，成本較高，因而迫切需要尋找簡(jiǎn)單廉價(jià)的替代培養(yǎng)基配方。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種簡(jiǎn)單廉價(jià)適合培養(yǎng)煙堿降解微生物的培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

發(fā)明概述

本發(fā)明所述的煙葉浸提液培養(yǎng)基中添加了煙葉浸提液，采用該培養(yǎng)基培養(yǎng)煙堿降解類微生物可以獲得更大的生物量，而且該煙葉浸提液培養(yǎng)基不需要額外添加各種微量元素和無(wú)機(jī)鹽，使該培養(yǎng)基配制簡(jiǎn)單、使用方便、成本低、適合工業(yè)化應(yīng)用。

發(fā)明詳述

一種煙葉浸提液，其特征在于，由如下步驟制得：

將煙葉碎片和水按照質(zhì)量體積比10～80∶1的比例混合，煮沸25～35分鐘，過(guò)濾除去沉淀，定容，即得煙葉浸提液；

所述的質(zhì)量體積比單位為g/L。

經(jīng)檢測(cè)，煙葉碎片與水按照10∶1比例混合時(shí)，煙葉浸提液含有煙堿1.3～1.8g/L，煙葉碎片與水按照20∶1比例混合時(shí)，煙葉浸提液含有煙堿1.9～2.5g/L，煙葉碎片與水按照40∶1比例混合時(shí)，煙葉浸提液含有煙堿3.9～4.5g/L，煙葉碎片與水按照60∶1比例混合時(shí)，煙葉浸提液含有煙堿6.2～6.8g/L，煙葉碎片與水按照80∶1比例混合時(shí)，煙葉浸提液含有煙堿9.2～9.8g/L。

一種煙葉浸提液培養(yǎng)基，其特征在于，組分如下：

煙葉浸提液1L，牛肉膏3～5g、蛋白胨5～10g、NaCl?5～10g、瓊脂18～22g，pH7.0～7.5。

優(yōu)選的，煙葉浸提液培養(yǎng)基成分如下：煙葉浸提液1L，牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、瓊脂20g，pH7.0～7.5，所述的煙葉浸提液由煙葉碎片與水按照20∶1的比例混合。

一種煙葉浸提液培養(yǎng)基，其特征在于，組分如下：

煙葉浸提液1L，葡萄糖3～7g、蛋白胨3～7g、酵母粉3～7g、瓊脂18～22g，pH自然。

優(yōu)選的，煙葉浸提液培養(yǎng)基成分如下：煙葉浸提液1L、葡萄糖3g、蛋白胨5g、酵母粉3g、瓊脂20g，pH自然，所述的煙葉浸提液由煙葉碎片與水按照20∶1的比例混合。

一種煙葉浸提液培養(yǎng)基，其特征在于，組分如下：

煙葉浸提液1L，酵母粉0.5～1g，pH7.0～7.5或pH自然。當(dāng)pH7.0～7.5時(shí)適合培養(yǎng)細(xì)菌類煙堿降解微生物，當(dāng)pH為自然時(shí)適合培養(yǎng)真菌類煙堿降解微生物。

優(yōu)選的，煙葉浸提液培養(yǎng)基成分如下：煙葉浸提液1L，酵母粉0.5g，pH7.0～7.5或pH自然，所述的煙葉浸提液由煙葉碎片與水按照20∶1或80∶1的比例混合。

本發(fā)明還提供上述煙葉浸提液培養(yǎng)基在培養(yǎng)煙堿降解微生物方面的應(yīng)用。

優(yōu)選的，所述煙堿降解微生物為：米曲霉(Aspergillus?oryzae)CGMCC?NO.3687、假單胞菌(Pseudomonas?sp.)CCTCC?NO.M207083、煙草假單胞菌(Pseudomonas?nicotianae)CGMCC?NO.0757、根癌土壤桿菌(Agrobacterium?tumefaciens)CCTCC?NO.M206131、巨大芽孢桿菌(Bacillus?megaterium)CGMCC?NO.0674之一。

所述煙葉碎片可由普通卷煙廠獲得。