[發明專利]抗J亞群禽白血病的多克隆抗體及其制備方法

無效

• 申請號: 201010173096.3
• 申請日: 2010-05-06
• 公開（公告）號: CN101863977A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發明（設計）人: 成子強;王曉偉;張利;王峰
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C07K16/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種抗J亞群禽白血病的多克隆抗體及其制備方法，其特征在于：按確定的gp37基因編碼的跨膜蛋白內27個氨基酸組成的高度保守序列合成免疫抑制區小肽，并且將小肽分別與鑰孔戚血藍素和牛血清白蛋白偶聯，采用高效液相色譜法進行合成純化鑒定，十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳方法鑒定偶聯效果；選用1.5個月左右，雄性健壯，體重2Kg左右的新西蘭大白兔，取磷酸鹽緩沖溶液稀釋的免疫抑制區小肽-鑰孔戚血藍素偶聯物0.5-1.0ml，與等量的完全弗氏佐劑充分乳化，在兔頸部或背部皮下6-12點注射，每點0.1-0.2ml，每只兔按抗原100-500μg的劑量注射；首免3-4周后第一次加強免疫，每只兔抗原劑量同第一次免疫，用不完全弗氏佐劑充分乳化，于兔頸部或者背部皮下6-12點注射，以后每隔1-3周加強免疫1次，從第1次加強免疫開始，每次免疫后7-10天，經耳靜脈或者耳動脈采血2-4ml采用間接酶聯免疫吸附法測定抗體的效價，經過加強免疫檢測符合要求后，頸靜脈采血，分離血清獲得多克隆抗體，-20℃無菌分裝保存。