[發明專利]一種新型抗腫瘤血管生成多肽

無效

• 申請號: 201010172226.1
• 申請日: 2010-05-14
• 公開（公告）號: CN101830971A
• 公開（公告）日: 2010-09-15
• 發明（設計）人: 祁元明;陳鯉翔;吳東棟;高艷鋒;康巧珍;王海麗;翟明霞
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;A61K38/10;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 王霞

技術領域

本發明涉及抗腫瘤藥物的研究，尤其是涉及一種新型抗腫瘤血管生成多肽。

背景技術

血管生成是在原有血管內皮細胞基礎上形成新血管的自然過程。血管生成在腫瘤生長和轉移過程中起著非常重要的作用，不僅可以為腫瘤生長和轉移提供必需的氧氣和營養物質，而且還可以帶走所產生的代謝廢物。許多與腫瘤血管生成相關的生長因子已經被鑒定出來，包括堿性呈纖維生長因子(bFGF)、表皮生長因子(EGF)、血管內皮生長因子(VEGF)、胎盤生長因子、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、以及血管生成素(Ang)等。目前腫瘤血管生成相關因子的研究主要集中于VEGF家族和Ang家族。

VEGF家族及其受體VEGFR在生理及病理性的血管與淋巴管的形成過程中起著非常重要的作用。VEGF家族包括六個成員，即VEGF-A，VEGF-B，VEGF-C，VEGF-D，VEGF-E和PIGF。在腫瘤血管生成的過程中，VEGF-A是最重要的調節者。VEGF-A是一個同源二聚體蛋白，能夠被選擇性地切割成為分別含有121、145、165、189和206個氨基酸殘基的片段。研究表明VEGF165在內皮細胞增殖、遷移和管狀形成過程中起著關鍵作用，VEGF165產生的信號優先通過酪氨酸激酶受體VEGFR-2(KDR)進行轉導，并且能夠通過與內皮細胞膜上的NRP-1相互作用形成包含VEGF165、KDR和NRP-1的三聚體復合物，從而使其信號轉導作用顯著增強。

血管內皮細胞上另一個重要的特異性酪氨酸激酶受體是Tie-2，其通過與配體Ang-1和Ang-2結合來調節血管生成的功能。Ang-1是一個活性配體，它不僅能夠誘導Tie-2磷酸化，而且可以促進內皮細胞生存、遷移和血管穩定。Ang-2是Ang-1的天然拮抗劑，能夠抑制Tie-2的作用，從而導致血管去穩定。此外，研究表明同時抑制由VEGFR-2和Tie-2介導的信號通路比單獨抑制其中一條通路有更強的維持正常血管及腫瘤相關血管完整和穩定的能力。因此，理想的抗血管生成療法可能需要同時抑制VEGFR-2和Tie-2介導的信號通路，從而能夠顯著抑制腫瘤的生長和轉移。

近年來，通過噬菌體展示文庫技術已經鑒定出許多內源性多肽，這些多肽在血管生成過程中起著重要的作用，其中包括兩條七肽，即ATWLPPR(V1)和NLLMAAS(V2)。ATWLPPR通過與NRP-1特異性結合并選擇性抑制VEGF?165與NRP-1結合來實現其體內外抗血管生成活性，從而抑制腫瘤的生長和轉移。而NLLMAAS則能夠以劑量依賴的方式來抑制Ang-1和Ang-2與Tie-2的結合并抑制Ang-1誘導的ERK活性，體內試驗表明NLLMAAS能夠抑制雞胚尿囊膜上的血管生成。因此，ATWLPPR、NLLMAAS及其它們的衍生物可能成為發展新型抗腫瘤血管生成和治療其他血管疾病的良好藥物。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能夠顯著抑制移植瘤生長和轉移的新型抗腫瘤血管生成多肽。

為實現上述目的，本發明可采取下述技術方案：

本發明所述的新型抗腫瘤血管生成多肽，由17個氨基酸殘基組成，分子量為1683，氨基酸序列為

Ala-Thr-Trp-Leu-Pro-Pro-Arg-Ala-Ala-Asn-Leu-Leu-Met-Ala-Ala-Ser。

所述多肽(V3肽)由V1肽和V2肽通過柔性連接子Ala-Ala構建而成；所述V1肽的氨基酸序列為Ala-Thr-Trp-Leu-Pro-Pro-Arg，分子量為840；所述V2肽的氨基酸序列為Asn-Leu-Leu-Met-Ala-Ala-Ser，分子量為717。

本發明的優點在于首次將兩條具有抗血管生成活性的多肽，即V1肽(ATWLPPR)和V2肽(NLLMAAS)通過柔性連接子Ala-Ala連接起來，從而構建一條新的多肽V3(ATWLPPRAANLLMAAS)。研究表明V3肽能夠顯著抑制S180和H22移植瘤的生長，并且隨著濃度的提高，抑瘤效果逐漸增強，呈現出明顯的劑量依賴性。此外，隨著V3肽濃度的升高，裸鼠移植瘤中的微血管數目逐漸減少，亦表現出一定的劑量依賴性。在相同濃度下，與V1、V2及V1+V2組相比，V3肽能夠表現出更強的抗腫瘤生長與抗腫瘤血管生成能力。同時，V3肽對裸鼠免疫系統及重要臟器無明顯毒性，給藥期間對裸鼠的體重增加沒有明顯影響。提示V3肽能夠成為一種有效的抗腫瘤候選藥物，從而為進一步的臨床研究與應用奠定堅實的基礎。

附圖說明

圖1、圖2、圖3分別是V1、V2、V3肽的質譜鑒定圖。