[發明專利]手足口病LAMP檢測試劑盒及其檢測方法

無效

• 申請號: 201010170608.0
• 申請日: 2010-05-10
• 公開（公告）號: CN102242223A
• 公開（公告）日: 2011-11-16
• 發明（設計）人: 劉代新;劉軍輝;李昂
• 申請（專利權）人: 上海吉美生物工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種手足口病病原體LAMP檢測試劑盒，包含以下成分

(1)病毒RNA提取試劑

病毒RNA的抽提可以采用常規的Trizol法，也可使用各生物公司生產的病毒RNA抽提試劑盒。

(2)LAMP檢測反應液

①反應液Cox?A16-用于檢測柯薩奇病毒A16型

含有以下成分：

10x?LAMP緩沖液(200mmol/L?Tris-HCl，100mmol/L?KCl，20mmol/LMgSO₄，100mmol/L(NH₄)SO₄，1.0％Tritonx-100)；100mmol/L?MgSO₄；25mmol/LdNTP；5mol/L?betaine(甜菜堿)；20umol/L引物CoxA16-FIP；20umol/L引物CoxA16-BIP；5umol/L引物CoxA16-F3；5umol/L引物CoxA16-B3；DEPC處理水。

其中引物序列為：

CoxA16-FIP：

5-AAGTRGGTTTCGGAGCCCCTTTTTTAGCCAAACCCAATGGTGAG-3

CoxA16-BIP：

5-TTYGCTTGGCARACTGCTACCATTTTAGGGGACTGACACTTGAGC-3

CoxA16-F3：5-ACATGCGCTTTGAYGCTGAA-3

CoxA16-B3：5-GCACTGGCTGGTGACATG-3

②反應液EV71-用于檢測腸道病毒71型

10x?LAMP緩沖液(200mmol/L?Tris-HCl，100mmol/L?KCl，20mmol/LMgSO₄，100mmol/L(NH₄)SO₄，1.0％Tritonx-100)；100mmol/LMgSO₄；25mmol/LdNTP；5mol/L?betaine(甜菜堿)；20umol/L引物EV71-FIP；20umol/L引物EV71-BIP；5umol/L引物EV71-F3；5umol/L引物EV71-B3；DEPC處理水。

其中引物序列為：

EV71-FIP：

5-CAACTTCCCCGGTGGGTGTGTTTTCCTACATGCGCTTTGATGCA-3

EV71-BIP：

5-TATGTTTGTGCCACCTGGAGCCTTTTGGGGTTAGTGGCGGTTTG-3

EV71-F3：5-GCGCAAATGCGTAGAAAGG-3

EV71-B3：5-AGGGTCTGACAGCTTGACAA-3

③酶混合液

包括Bst?DNA聚合酶(8U/ul)和AMV逆轉錄酶(8U/ul)