[發明專利]一種松烏甲素的制備方法

無效

• 申請號: 201010167254.4
• 申請日: 2010-05-07
• 公開（公告）號: CN101851202A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 馬學毅
• 申請（專利權）人: 蘭州大學
• 主分類號: C07D221/22
• 分類號: C07D221/22
• 代理公司: 甘肅省知識產權事務中心 62100
• 代理人: 劉繼春

1.一種松烏甲素的制備方法，其特征在于，包括兩大步驟：

第一，從松潘烏頭提取總生物堿；

1.1?取過60～80目標準篩的松潘烏頭根粉300g，盛于5000～10000ml的細口瓶中，加入重量百分比濃度8～15％氨水300ml；

1.2?用重量百分比濃度60～80％乙醇3000～6000ml作為提取溶劑，用超聲波提取器超聲浸提兩次；第一次浸提后，傾出浸提液，補加800～1500ml提取溶劑，進行第二次浸提并傾出浸提液，合并兩次所得浸提液；每次提取時間10～30min，提取溫度50～75℃；

1.3?將浸提液過濾，于旋轉蒸發器將濾液濃縮，回收溶劑，用重量百分比濃度1～5％的鹽酸萃取3次，合并萃取液；加氨水調pH值至7～11，氯仿萃取2～4次，回收溶劑后產生白色沉淀，靜置過濾，干燥恒重得松潘烏頭總生物堿；

第二，用高速逆流色譜(HSCCC)將總生物堿分離制備目標化合物松烏甲素；

2.1?準備兩相溶劑系統

將正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水，按照體積比為1∶2～2.3∶2～2.3∶1～1.2配比混合，

或將石油醚∶乙酸乙酯∶甲醇∶水，按照體積比為17～19∶22～24∶17～20∶13～16配比混合，充分搖勻后，在室溫下靜置8～12h分層為上、下相，分離兩相，上相作為固定相，下相作為流動相；

2.2?準備松潘烏頭總堿溶液

取松潘烏頭總堿150～180mg溶于40～80mL的下相中，超聲助溶15～30min，移入50mL～100mL的容量瓶中，加下相至刻度，搖勻得松潘烏頭總堿溶液；

2.3?高速逆流色譜分離松潘烏頭總堿溶液制備較高含量的生物堿

以10mL/min的流速泵入固定相，待固定相充滿管道后，打開主機設定螺旋柱線圈的旋轉速度為700～900r/min，使螺線管順時針旋轉，當達到設定轉速時，以2mL/min的流速泵入流動相；當流動相從主機出口流出時，開始進松潘烏頭總堿溶液，進樣量為5mL，流速1mL/min，檢測波長282nm，主機溫度20～30℃；

進樣前檢測松潘烏頭總堿溶液中松烏甲素的含量，逆流出峰后每5mL收集—管并編號，用高效液相色譜檢測每管中的松烏甲素含量；經第一次HSCCC粗分，獲得松烏甲素含量79.1～83.5％的生物堿；

2.4?高速逆流色譜分離生物堿制備高純度松烏甲素

將第一次HSCCC粗分所獲得的生物堿，溶于30～40mL的下相中，超聲助溶15～30min，移入50mL的容量瓶中，加下相至50mL刻度，搖勻得生物堿溶液；

以10mL/min的流速泵入固定相，待固定相充滿管道后，打開主機設定螺旋柱線圈的轉速為700～900r/min，使螺線管順時針旋轉，當達到設定轉速時，以2mL/min的流速泵入流動相；當流動相從主機出口流出時，開始進生物堿溶液，進樣量為5mL，流速1mL/min，檢測波長282nm，主機溫度20～30℃；逆流出峰后每5mL收集—管并編號，用高效液相色譜檢測每管中的松烏甲素含量；最高純度的松烏甲素達到99.65％。