[發(fā)明專利]一種龍腦的生物合成方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010165725.8
• 申請日: 2010-05-07
• 公開（公告）號: CN101857883A
• 公開（公告）日: 2010-10-13
• 發(fā)明（設計）人: 劉幽燕;羅苷莉;李青云;韋藤幼
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C12P7/02
• 分類號: C12P7/02;C12R1/22
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司 45114
• 代理人: 鄧曉安

1.一種龍腦的生物合成方法，其特征在于：包括生物催化劑制備、酶促水解反應、生物催化劑分離、龍腦產品分離，工藝過程如下：將菌株在發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵，然后離心發(fā)酵液收集細胞作為生物催化劑；將制備好的生物催化劑加入到含乙酸龍腦酯的有機溶劑-緩沖鹽混合體系或緩沖鹽溶液中，進行酶促水解反應；酶促水解反應結束后先將生物催化劑分離；分離生物催化劑后，采用常規(guī)的分離方法將龍腦產品從反應液中與未反應的乙酸龍腦酯分離，得到龍腦產品。

2.根據權利要求1所述的龍腦的生物合成方法，其特征在于：生物催化劑制備所用的菌種為特氏克雷伯氏菌(Klebsiella?planticola)。

3.根據權利要求1所述的龍腦的生物合成方法，其特征在于：生物催化劑制備所用的發(fā)酵培養(yǎng)基主要成分包括玉米粉、蛋白胨、淀粉、蔗糖、葡萄糖、廢糖蜜、馬鈴薯汁、牛肉膏、KH₂PO₄、MgSO₄、NaCl、(NH₄)₂SO₄中的一種或者多種的混合物，用量分別為：玉米粉或蛋白胨5～20g/L，淀粉、蔗糖、葡萄糖、廢糖蜜或馬鈴薯汁5～20g/L，牛肉膏1.0～5.0g/L，KH₂PO₄?0.5～1.5g/L，MgSO₄?0.05～0.5g/L，NaCl?0.2～2.0g/L，(NH₄)₂SO₄?0.5～5.0g/L；生物催化劑制備的發(fā)酵條件為：25～-50℃，pH5.5～9.0，轉速100～400rpm，培養(yǎng)時間1～3天。

4.根據權利要求1所述的龍腦的生物合成方法，其特征在于：乙酸龍腦酯酶促水解反應中有機溶劑的體積含量為0～20％。

5.根據權利要求4所述的龍腦的生物合成方法，其特征在于：乙酸龍腦酯酶促水解反應中有機溶劑的體積含量為0～10％。

6.根據權利要求1所述的龍腦的生物合成方法，其特征在于：酶促水解反應中所用的有機溶劑選自石油醚、乙醇、乙酸乙酯或正己烷中的一種。

7.根據權利要求1所述的龍腦的生物合成方法，其特征在于：酶促水解反應在搖床中進行，搖床轉速為50～300rpm，乙酸龍腦酯加入量為0.01～0.5M，反應的溫度為20～35℃，時間為2～7天。

8.根據權利要求1～7所述的龍腦的生物合成方法，其特征在于：酶促水解反應所用的緩沖鹽為磷酸鹽緩沖液或磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液，pH為6.0～8.0。

9.根據權利要求1項所述的龍腦的生物合成方法，其特征在于：分離生物催化劑是用過濾的方法。

10.根據權利要求1所述的龍腦的生物合成方法，其特征在于：龍腦產品分離選用的分離方法包括：萃取、蒸餾、重結晶、干燥或其他常規(guī)分離方法。