[發明專利]抗體單價化多聚標記法生產的競爭免疫檢測試劑盒及其使用方法和應用

無效

• 申請號: 201010163062.6
• 申請日: 2010-05-04
• 公開（公告）號: CN101825628A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發明（設計）人: 費小戰;齊兵玉;王凱;李學斌
• 申請（專利權）人: 武漢伊艾博科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/533;G01N33/535
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 涂潔

1.一種抗體單價化多聚標記法生產的競爭免疫法檢測小分子的試劑盒，包括固相載體、小分子標準品、標記物復合物，其特征在于，所述固相載體為固定有小分子-載體藕聯物的固相載體，所述標記物復合物為單價抗體-多聚標記物復合物。

2.如權利要求1所述的抗體單價化多聚標記法生產的競爭免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述單價抗體-多聚標記物復合物由下述方法制備而成：(1)特異性抗體單價化及單價抗體的純化：用木瓜蛋白酶消化抗體成Fc片斷和Fab片段，制備抗Fab片段抗體的Sepharose柱，通過親和層析方法純化Fab片段，得到單價化抗體片斷；(2)標記物與多聚載體的藕聯，按照標記物的本身特性與載體藕聯，讓其在其載體上形成多聚或者串珠結構，得到多聚標記物；(3)將步驟(1)中得到的的單價抗體片斷與步驟(2)中得到的多聚標記物按照1∶1藕聯得到單價抗體-多聚標記物復合物。

3.如權利要求1或2所述的抗體單價化多聚標記法生產的競爭免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述固定有小分子-載體藕聯物固相載體由下述方法制成：先將小分子與載體蛋白藕聯得到小分子-載體藕聯物，然后，將其固定或者藕聯到固相載體上得到固定有小分子-載體藕聯物固相載體。

4.如權利要求2所述的抗體單價化多聚標記法生產的競爭免疫檢測試劑盒，其特征在于，步驟(2)中所述多聚載體為多聚賴氨酸，葡聚糖或聚乙二醇。

5.如權利要求1-4任一項所述免疫檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：(1)向小分子-載體藕聯物的固相載體中加入小分子標準品或待測樣品；(2)加入單價抗體-多聚標記物復合物，使小分子標準品或待測樣品與固定化的小分子-載體藕聯物同步競爭與單價抗體-多聚標記物復合物結合；(3)加入標記用酶對應的底物顯色，終止反應后通過酶標儀特定波長記錄吸光值，或使用熒光標記物的直接讀取熒光數值；(4)繪制標準品曲線，計算待檢物濃度。

6.如權利要求5所述免疫檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：所述步驟(2)中小分子標準品或待測樣品與固定化的小分子-載體藕聯物同步競爭與單價抗體-多聚酶復合物在37℃反應45-90分鐘。

7.權利要求1-4中任一項試劑盒在競爭免疫法檢測小分子中的應用。