[發明專利]巰基化殼聚糖包裹人參納米顆粒的制備方法

無效

• 申請號: 201010162832.5
• 申請日: 2010-04-08
• 公開（公告）號: CN102210733A
• 公開（公告）日: 2011-10-12
• 發明（設計）人: 楊建設;周綱;張龍;劉勇
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘭州化學物理研究所
• 主分類號: A61K36/258
• 分類號: A61K36/258;A61K9/16;A61K47/36
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司 62002
• 代理人: 方曉佳

技術領域

本發明涉及一種巰基化殼聚糖包裹人參納米顆粒的制備方法。

背景技術

近年來，中藥現代化逐步加強，尤其是對納米天然藥材的研究與開發已倍受重視。徐輝碧(納米技術在中藥研究中的應用.中國藥科大學學報，2001.)等率先將納米技術引進中藥研發，發現將中藥牛黃加工到納米級的水平，不僅能提高藥效和生物利用度，甚至可能產生新的藥理效果，具有極強的靶向作用，并據此提出了“納米中藥”的科學概念。此后，又有人對100多種中藥進行了研究，已經獲得平均粒徑僅有17nm的血竭，23nm的蜂膠等的納米顆粒。

殼聚糖是一種天然聚陽離子堿性多糖，近年來，研究特別側重于生物醫學及藥物制劑等領域，證實殼聚糖具有生物黏附性和多種生物活性，它能與活體組織相容，不會引起過敏反應和排斥現象，其被體內的溶菌酶、胃蛋白酶降解后，降解產物能完全地被人體吸收，無毒、無副作用，較適于作為緩控釋輔料。殼聚糖包封藥物后，可使其釋放減慢、療效延長，毒副作用降低。利用殼聚糖制備緩釋、控釋制劑已成為近年來新劑型研究的熱點。

發明內容

本發明的目的在于提供一種巰基化殼聚糖包裹人參納米顆粒的制備方法。

本發明以巰基乙酸作為巰基供體，對殼聚糖進行化學修飾，并以人參納米顆粒作為模型藥物進行包裹，應用巰基敏感的熒光試劑進行熒光標記，制備了熒光標記的巰基化殼聚糖包裹人參納米顆粒。

本發明在乙酸和乙醇的混合溶劑中，以巰基乙酸為羧基供體，殼聚糖表面的羥基為受體，合成了巰基化殼聚糖；再利用三聚磷酸鈉為交聯劑，包裹人參納米顆粒。

一種巰基化殼聚糖包裹人參納米顆粒的制備方法，其特征在于該方法步驟為：

A、將巰基化殼聚糖溶于由乙酸和無水乙醇組成的混合溶劑中，加入人參納米顆粒，以三聚磷酸鈉水溶液為交聯劑進行包裹，得到巰基化殼聚糖包裹的人參納米顆粒微球；

B、將巰基敏感熒光試劑溶于N，N-二甲基甲酰胺，加入磷酸鹽緩沖液，在常壓以及25℃-36℃條件下，使巰基敏感熒光試劑與巰基化殼聚糖包裹的人參納米顆粒微球充分反應后，裝入透析袋，進行透析，得到產物。

在透析完成后，從透析袋中取少量的溶液，進行熒光電鏡的檢測，完成巰基化殼聚糖載藥納米顆粒微球的熒光標記。

在A步驟中，無水乙醇與乙酸的體積比為1∶1-5。

在A步驟中，三聚磷酸鈉水溶液的濃度為1-2mg/ml。

在A步驟中，人參納米顆粒的制備方法來源于中國專利(液相超聲制備納米天然藥材顆粒方法200910117753.X)。

在B步驟中，巰基敏感熒光試劑與磷酸鹽緩沖液的體積比為1∶6000-10000。

在B步驟中，1mg巰基敏感熒光試劑溶于N，N-二甲基甲酰胺100-300μl中。

在B步驟中，磷酸鹽緩沖液的pH值為7.1-7.4。

本發明制備出了能夠帶有熒光基團的人參納米顆粒，這些顆粒既保持有納米級尺度，又具有熒光特征。

本發明的優點是能夠以巰基乙酸作為巰基供體，對殼聚糖進行化學修飾，并以人參納米顆粒作為模型藥物進行包裹，應用巰基敏感的熒光試劑進行熒光標記，制備了熒光標記的巰基化的殼聚糖包裹人參納米顆粒。對其進行了相關的性質的表征和檢測。

通過掃描電鏡和熒光電鏡分析，結果顯示巰基化殼聚糖人參納米顆粒形狀規則，具有核-殼結構，濕態下平均粒徑約為300-350nm；同時在生理pH下它還具有很強的熒光活性。

本發明的用途：殼聚糖具有生物黏附性和多種生物活性，它能與活體組織相容，不會引起過敏反應和排斥現象，其被體內的溶菌酶、胃蛋白酶降解后，降解產物能完全地被人體吸收，無毒、無副作用，較適于作為緩控釋輔料。

殼聚糖包封藥物后，可使其釋放減慢、療效延長，毒副作用降低。利用巰基化殼聚糖包裹的人參納米顆粒，可使其帶有熒光特性，在動物體內顯示出納米人參顆粒的代謝途徑。

具體實施方式

實施例1

巰基化殼聚糖載藥納米顆粒的制備采用溶劑揮發法：稱取0.1g巰基化殼聚糖溶于乙酸與無水乙醇混合液(60ml，乙酸∶乙醇＝1∶1)中，加熱攪拌超聲至完全溶解后加入人參納米顆粒，磁力攪拌，至完全分散，繼續磁力攪拌且同時逐滴緩慢加入三聚磷酸鈉水溶液(1mg/ml)，得到巰基化殼聚糖包裹人參納米顆粒的微球。取微球溶液進行掃描電鏡檢測。

巰基化殼聚糖載藥納米顆粒微球的熒光標記：將熒光試劑溶于N，N-二甲基甲酰胺(1mg∶100μl)，加入磷酸鹽緩沖液(pH＝7.1)。保溫在25℃條件下反應。熒光試劑與巰基化殼聚糖載藥納米顆粒充分反應后，裝入透析袋，進行透析。