[發明專利]一種含三苯胺基團的快速熒光增強劑

無效

• 申請號: 201010161180.3
• 申請日: 2010-04-22
• 公開（公告）號: CN101818055A
• 公開（公告）日: 2010-09-01
• 發明（設計）人: 王筱梅;張唯舟
• 申請（專利權）人: 蘇州科技學院
• 主分類號: C09K11/06
• 分類號: C09K11/06;G01N33/00
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 陶海鋒

技術領域

本發明屬于熒光增強試劑領域、熒光顯微成像檢測領域，具體涉及一種含 三苯胺的發光小分子，所述發光小分子可與含氨基的化合物快速鍵合，使含氨 基的化合物立刻發出明亮的藍光，具有快速熒光增強效應。

背景技術

20世紀80年代以來，由于一系列食品原料的化學污染導致的食源性疾病呈 上升趨勢，食品安全問題為全世界所關注。如氨基甲酸酯類農藥為乙膽堿酯酶 的抑制劑，后者在神經傳導中起著重要的作用，緩解神經的高度興奮，以確保 神經脈沖的有效傳送。當氨基甲酸酯類農藥在農業生產中的大量使用，不可避 免導致瓜果、蔬菜殘留氨基甲酸酯類農藥，對人類健康將造成較大危害。

目前，氨基甲酸酯類農藥殘留檢測多采用薄層色譜法、氣相色譜法、搞笑 液相色譜法等，例如，色譜分析法：氣象色譜、高效液相色譜、氣-質聯用或液- 質聯用；生物檢測法：乙酰膽堿酯酶抑制法、植物水解酶與植物酶抑制技術測 定；生物傳感器法：電流乙酰膽堿酯酶生物傳感器法；免疫分析法：酶聯免疫 測定法；化學計量學分析法(李志偉.梁丹.張建夫.華中農業大學學報.2008(27)， 691～695)。這些方法的檢測限低、靈敏度高，已有相關的技術標準可供參考， 但由于需要昂貴的設備、專門的操作人員，以及樣品前處理復雜、成本高、時 間長，因此不能滿足快速簡便的現場檢測要求，現場的食品快速檢測方法要求： ①實驗準備簡化，使用的試劑較少，配制好的試劑保存期長；②樣品前處理簡 單，對操作人員要求低；③分析方法簡單、準確和快速。

王忠東等人發表的文章公開了一種用于檢測氨基甲酸酯類農藥殘留的熒光 系統，該系統由激發熒光和傳輸熒光的光學系統與探測熒光和處理熒光信號的 電子系統組成；采用單光源、雙光路結構，能夠對測量信號和參考信號同時進 行處理；采用所設計的筒式光纖探頭激發并探測熒光，設計了相應的信號處理 電路，實現了計算機管理(參見：王忠東.王玉田.李艷春.光學技術.2005(31))。 該方案主要對檢測系統進行了設計，從而使氨基甲酸酯類農藥的檢測準確。

若在激光激發下的“雙光子熒光”發生的區域可限制在λ³(λ為入射光波長) 量級的空間體積內，將使得發色團的激發更具有高度的空間選擇性，將進一步 提高檢測的靈敏度和選擇性，但目前未見氨基甲基酯類化合物的雙光子熒光實 時監測的報道。

技術方案

本發明的目的是提供一種含三苯胺基團的快速熒光增強劑。

為達到上述目的，本發明采用的技術方案是一種含三苯胺基團的快速熒光 增強劑，4-N，N-二苯基氨基苯甲酸琥珀酰亞胺(TBA-SCM)，呈“D-π-A”結構特 征，其中三苯胺基為電子給體“D”，琥珀酰胺基為電子受體“A”，羧基為“π-橋”， 其化學式為：

上述熒光增強劑的制備方法包括以下步驟：

(1)合成4-N，N-二苯基氨基苯甲酸：使用高錳酸鉀氧化4-N，N-二苯基氨基苯 甲醛，然后使用鹽酸調節體系pH至酸性，冷卻靜置析出晶體，抽濾洗滌干燥得 到4-N，N-二苯基氨基苯甲酸；

(2)取等摩爾的4-N，N-二苯基氨基苯甲酸和二環己基碳二亞胺溶于二氯甲烷 中，再加入N-羥基琥珀酰胺，室溫反應至少18h，過濾，將濾液進行柱層析分 離，濃縮得到淡黃色粉末，即4-N，N-二苯基氨基苯甲酸琥珀酰亞胺(TBA-SCM)。

上述技術方案中，所述熒光增強劑是以三苯胺基團為“電子給體”、琥珀酰 胺為“電子受體”、羧基為“橋”的不對稱分子；可與含氨基的有機分子(發光 或不發光)瞬時通過酰胺鍵鍵合，使結合后產生的產物在硅膠版上呈現明亮的 藍光，因此，可以應用于含有氨基的化合物的熒光檢測中，例如，實時檢測氨 基甲基酯類化合物。

因此，本發明同時要求保護所述熒光增強劑在實時監測含有氨基的化合物 中的應用，以及在檢測氨基甲基酯類化合物的應用。

由于上述技術方案運用，本發明與現有技術相比具有下列優點：

1.本發明所述4-N，N-二苯基氨基苯甲酸琥珀酰亞胺(TBA-SCM)，具有快 速熒光增強效應特性，可快速與檢測物中的氨基反應形成酰胺鍵，從而完成識 別分子熒光信號的檢測，可對食品中氨基甲酸酯類農藥樣品實現實時檢測；