[發明專利]一種檢測棗酊中酸棗仁皂苷和當藥黃酮素含量的方法

有效

• 申請號: 201010158560.1
• 申請日: 2010-04-28
• 公開（公告）號: CN101806785A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發明（設計）人: 胡斌;王昇;郭吉兆;王洪波;郭軍偉;蔡君蘭;張曉兵;謝復煒;劉惠民
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司鄭州煙草研究院
• 主分類號: G01N30/36
• 分類號: G01N30/36;G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 陳浩

技術領域

本發明涉及一種檢測棗酊中酸棗仁皂苷和當藥黃酮素含量的方法，屬于痕量分析技術領域。

背景技術

紅棗是一種營養豐富的果實，其中含有多種營養物質，比如皂苷類，黃酮類，生物堿類，糖類，氨基酸類。棗仁中可以分離得到酸棗仁皂苷A和B；紅棗的種子中還能提取出黃酮C-葡萄糖甙（即當藥黃酮素或當藥黃素），當藥黃酮素和酸棗仁皂苷都是具有提高免疫等保健功效的活性物質。棗酊是常見的煙用香精香料，在煙草制品的加香、矯味中經常使用。當前隨著煙用香精香料品質控制日益收到關注，香原料的主要成分及特有成分，尤其是具有這些具有免疫保健功效的成分的分析檢測也成為熱點。

目前針對酸棗仁皂苷A和B常用的是高效液相色譜結合二極管陣列檢測器（DAD檢測器）的檢測方法，但是經過對比酸棗仁皂苷A和B在DAD檢測器上的相應強度并不理想，從而影響檢測精準度。而且同時檢測酸棗仁皂苷及當藥黃酮素的方法未見報導。

發明內容

本發明的目的是提供一種檢測準確度且能夠同時檢測棗酊中酸棗仁皂苷和當藥黃酮素含量的方法。

為了實現以上目的，本發明所采用的技術方案是：一種檢測棗酊中酸棗仁皂苷和當藥黃酮素含量的方法，其是以乙腈與0.1%甲酸水溶液的混合液為流動相，采用高效液相色譜法進行檢測，其中高效液相色譜所采用的檢測器為蒸發光散射檢測器（ELSD）。

所述流動相中乙腈與0.1%甲酸水溶液的體積比為60：40~75：25。

本發明的檢測方法具體步驟如下：

1）標準工作曲線制定：在0.014-0.19mg/ml范圍內用流動相配制含有當藥黃酮素、酸棗仁皂苷A和酸棗仁皂苷B的三種標準品的至少三個濃度的混合標準溶液，再利用高效液相色譜儀分別對上述所有濃度的混合標準溶液中的三種標準品的含量進行檢測，并根據三種標準品的峰面積和相應的濃度分別繪制三種標準品的標準工作曲線并計算得到其回歸方程；

2）樣品的預處理：稱取棗酊樣品于加入流動相，經過超聲萃取后離心處理，取上層清液，過濾得到樣品溶液；再利用高效液相色譜儀采用與步驟1）相同的條件分別對樣品溶液進行檢測，并根據得到的峰面積分別帶入標準工作曲線的回歸方程中，計算出樣品中的當藥黃酮素、酸棗仁皂苷A和酸棗仁皂苷B的含量；

步驟1）、2）中的高效液相色譜條件為：色譜柱：C18（4.6×150mm）；流速：0.8ml/min；

蒸發光散射檢測器條件：漂移管溫度?79~81.5℃；氣流量：2.0~2.2L/min。

所述混合標準溶液中當藥黃酮素的濃度范圍為0.038-0.19mg/ml，酸棗仁皂苷A的濃度范圍為0.01-0.1mg/ml，酸棗仁皂苷B的濃度范圍為0.014-0.14mg/ml。

本發明的檢測棗酊中酸棗仁皂苷和當藥黃酮素含量的方法，乙腈和甲酸水溶液可以同時作為流動相和樣品的萃取劑，使樣品的前處理較為簡單，而且高效液相色譜的檢測器采用蒸發光散射檢測器（ELSD），被測目標物在該檢測器上的信號較強，有較好的匹配性，而且形成了較好的函數對應關系，提高了檢測的準確度。另外，本發明通過優化流動相中有機相比例，及ELSD漂移管的溫度和載氣流量，提高了被測目標物在色譜柱上的分離度，減少了色譜基線噪音，獲得了將為明顯的色譜峰，提高了檢測準確度。

附圖說明

圖1為混合標準溶液的色譜圖；

圖2為當藥黃酮素的標準工作曲線圖；

圖3為酸棗仁皂苷A的標準工作曲線圖；

圖4為酸棗仁皂苷B的標準工作曲線圖；

圖5為當藥黃酮素的標準雙對數曲線圖；

圖6為酸棗仁皂苷A的標準雙對數曲線圖；

圖7為酸棗仁皂苷B的標準雙對數曲線圖；

圖8為對比實驗示意圖。

具體實施方式

以下結合具體實施例對本發明的方法做詳細的介紹：

本發明的檢測棗酊中酸棗仁皂苷和當藥黃酮素含量的方法具體包括如下步驟：

高效液相色譜條件：

色譜柱：YMC-ODS-A?C18（4.6×150mm，5μm）；

流動相：乙腈-0.1％甲酸水溶液＝60∶40；

流速：0.8ml/min；

進樣量：5μl；

蒸發光散射檢測器條件：

漂移管溫度?81.5℃；

氣流量：2.2L/min。