[發明專利]一種嗜熱一氧化碳鏈霉菌菌株及其培養方法

有效

• 申請號: 201010158209.2
• 申請日: 2010-04-20
• 公開（公告）號: CN102061270A
• 公開（公告）日: 2011-05-18
• 發明（設計）人: 胡興;李昌靈;侯艷飛
• 申請（專利權）人: 懷化學院;胡興
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬微生物技術領域，主要是一種可產生纖維素酶，且能使纖維素水解的一種放線菌菌株，本發明還涉及該菌株的培養方法。?

背景技術

纖維素是植物體內的結構多糖，植物的枝葉、秸稈等都含有大量的纖維素。世界上每年生成1500億噸植物性有機物，其中約一半為纖維素物質，將天然纖維素降解為可利用的糖，再進一步轉化為燃料酒精和燃氣等能源物質或菌體蛋白等食品，不僅可緩解當今世界面臨的糧食和能源危機，還可減少纖維素廢料引起的環境污染。由于微生物生長周期短，生長快，因此，篩選能高效降解纖維素的目的菌株至關重要。如何將纖維素物質降解轉化為糖，乙醇，甲烷等容易利用的小分子有機物是當前國際上的重大課題之一。目前，用于生產商業用酶的菌株主要是曲霉和木霉屬的一些真菌，且以固體發酵為主，生產周期長，提取困難。到目前為止，尚未見到有用于工業生產纖維素酶的放線菌的菌株報導。?

發明內容

本發明的目的正是為了克服上述現有技術的不足而提供一種可用于生產纖維素酶，并能有效地促進纖維素降解轉化為單糖的放線菌菌株嗜熱一氧化碳鏈霉菌。?

本發明的另一目的是提供該嗜熱一氧化碳鏈霉菌的培養方法。?

一種鏈霉菌菌株，命名為嗜熱一氧化碳鏈霉菌(Streptomyces?thermocarboxydus)Str430，該菌種已保藏在中國典型培養物保藏中心，保藏日：2010年01月26日，保藏號：：CCTCC?M?2010026。本申請附該單位出具的樣品檢測報告(No：209043)。?

本發明的Str430菌落圓形、表面絨毛狀、灰色、基部顏色淺褐色、氣生菌絲豐茂且成螺旋狀，具有兩輪分枝、產生橢圓形分生孢子。?

本發明的Str430菌株培養方式為：?

(1)液體培養：把菌株接種于發酵培養基中，在30℃溫度下，轉速100r的搖床上培養32～36小時。?

(2)固體培養：把菌株接種于高氏一號培養基中，于30℃培養箱中培養3～4天。?

本發明的Str430能夠分泌纖維素酶，其作用機理是引起纖維素的分散和脫纖化，使纖維素的結晶結構被打亂導致變形，使纖維素酶能深入纖維素分子界面之間，從而使纖維素孔壁、腔壁和微裂隙壁的壓力增大，水分子的介入又使纖維素分子之間的氫鍵被破壞，產生部分可溶性的纖維的微結晶，利于進一步降解形成纖維寡糖和葡萄糖。?

附圖說明

圖1是嗜熱一氧化碳鏈霉菌Str430氣生菌絲(1000×)在光學顯微鏡的顯微圖。?

圖2是嗜熱一氧化碳鏈霉菌Str430孢子絲(2000×)在光學顯微?鏡的顯微圖。?

圖3是嗜熱一氧化碳鏈霉菌Str430菌絲的電鏡圖。?

圖4是嗜熱一氧化碳鏈霉菌Str430孢子的電鏡圖。?

下面詳細描述本發明。?

具體實施方式

從湖南省懷化市爛稻草表層土壤中分離到嗜熱一氧化碳鏈霉菌Str430，其分離與篩選過程為：?

①采集土壤樣品；?

②纖維素固體平板進行粗篩；?

③三角瓶液體發酵進行復篩；?

④獲得高產菌株Str430；?

⑤菌株Str430的生理生化和分子水平鑒定，確定得到菌株Str430：嗜熱一氧化碳鏈霉菌。?

其菌株的培養采用：?

(1)、液體培養：接種于發酵培養基(淀粉10g、玉米粉10g、葡萄糖5g、酵母膏10g、(NH₄)₂SO₄5g，KH₂PO₄5g、K₂HPO₄5g、CaCO₃1g、MgSO₄0.5g、CMC-Na?5g、pH7.5，加水1000ml滅菌)中，在30℃溫度下，轉速100r的搖床上培養32～36小時。纖維素酶液的制備方法是將液體培養的菌液4000r/min，4℃條件下，冷凍離心15分鐘并取其上清液，即得粗酶液，通過DNS法測定粗酶液中還原糖含量，間接地得出CMCase和FPase酶的活力。?