[發明專利]一種從落葉松加工剩余物粗提物中分離純化紫杉葉素的方法

無效

• 申請號: 201010157503.1
• 申請日: 2010-04-28
• 公開（公告）號: CN101830880A
• 公開（公告）日: 2010-09-15
• 發明（設計）人: 付玉杰;祖元剛;李雙明;王瑩;羅猛;劉威;孔羽;吳楠
• 申請（專利權）人: 東北林業大學;付玉杰
• 主分類號: C07D311/32
• 分類號: C07D311/32;C07D311/40
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種從落葉松加工剩余物粗提物中分離純化紫杉葉素的方法，該方法通過以下步驟實現：

(1)將落葉松加工剩余物的粗提物加入到乙醇中，攪拌充分溶解后，加入AB-8樹脂，加熱至乙醇揮干；

(2)AB-8樹脂柱層析的制備：將AB-8樹脂填充至玻璃柱中，用2BV體積分數95％乙醇，數次洗脫，以2BV/h流速通過樹脂層，其中BV為樹脂床體積，洗至流出液加水不呈白色混濁為止，并用蒸餾水以同樣的流速洗凈乙醇備用；

(3)將步驟(1)中吸附樣品的樹脂，加入到樹脂柱中，加入乙醇溶液進行梯度洗脫，收集含有紫杉葉素的餾分，濃縮至干；

(4)硅膠柱層析：將樹脂富集后的樣品，加入到正相硅膠柱層析中，柱層析用上樣溶劑平衡后，用洗脫劑洗脫，將洗脫液靜置3～4天后，紫杉葉素析出晶體，過濾得到晶體，自然風干。

2.按照權利要求1所述的一種從落葉松加工剩余物粗提物中分離純化紫杉葉素的方法，其特征在于步驟(1)所述的落葉松加工剩余物，主要來源包括在中國分布較廣的興安落葉松、華北落葉松、西伯利亞落葉松、紅杉和大果紅杉等。

3.按照權利要求1所述的一種從落葉松加工剩余物粗提物中分離純化紫杉葉素的方法，其特征在于步驟(1)中所述的加入AB-8樹脂，目的是將乙醇溶液中的樣品吸附到樹脂上。

4.按照權利要求1所述的一種從落葉松加工剩余物粗提物中分離純化紫杉葉素的方法，其特征在于步驟(2)中所述的AB-8樹脂柱層析的制備，是將AB-8樹脂填充到玻璃柱中，使之形成以樹脂為填料的的層析柱。

5.按照權利要求1所述的一種從落葉松加工剩余物粗提物中分離純化紫杉葉素的方法，其特征在于步驟(3)所述的乙醇溶液梯度洗脫，具體包括用5BV體積分數為10％的乙醇溶液和25BV體積分數為20％的乙醇溶液依次進行洗脫。

6.按照權利要求1所述的一種從落葉松加工剩余物粗提物中分離純化紫杉葉素的方法，其特征在于步驟(4)所述的硅膠柱層析，所用填料為正相硅膠柱層析。

7.按照權利要求1所述的一種從落葉松加工剩余物粗提物中分離純化紫杉葉素的方法，其特征在于步驟(4)所述的洗脫劑洗脫步驟為：三氯甲烷；體積比為30/1的三氯甲烷/甲醇；體積比為25/1的三氯甲烷∶甲醇；體積比為20/1的三氯甲烷/甲醇。

8.按照權利要求1所述的一種從落葉松加工剩余物粗提物中分離純化紫杉葉素的方法，其特征在于步驟(4)所述的洗脫液靜置，為體積比為20/1的三氯甲烷/甲醇洗脫部分。