[發明專利]連翹酯苷用作抗真菌藥物增效劑的用途

無效

• 申請號: 201010157463.0
• 申請日: 2010-04-27
• 公開（公告）號: CN101816666A
• 公開（公告）日: 2010-09-01
• 發明（設計）人: 劉偉;劉銀麗;曹永兵;姜遠英
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: A61K31/7032
• 分類號: A61K31/7032;A61P31/10;A61K31/4196;A61K31/496;A61K31/4174
• 代理公司: 上海德昭知識產權代理有限公司 31204
• 代理人: 丁振英

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，是連翹酯苷用作抗真菌藥物增效劑的新用途。

背景技術

連翹酯苷為中藥連翹的主要有效成分之一。研究顯示，連翹酯苷具有抗微生物、抗病毒、抗氧化、抑制彈性蛋白酶和誘生α干擾素等藥理作用，但未見其有抗真菌作用的報道，更未見其作為抗真菌藥物增效劑與抗真菌藥物聯合使用治療真菌病的報道。

發明內容

本發明提供一種連翹酯苷作為抗真菌藥物增效劑的新用途。經體外細胞實驗和動物實驗表明，連翹酯苷對氟康唑、伊曲康唑、咪康唑、酮康唑等抗真菌藥物有明顯的增效作用；對于臨床耐藥性真菌菌株，當抗真菌藥物和連翹酯苷合用時，能明顯降低抗真菌藥物的用藥劑量，并增強對耐藥真菌的抑制作用，使抗真菌藥物恢復對耐藥真菌的作用。因此可將連翹酯苷用作抗真菌藥物的增效劑，用于不同深部或淺部真菌感染的治療。

本發明為連翹酯苷開辟了新的用途，將其用于抗真菌藥物的增效劑，不僅能提高藥物的抗真菌作用，而且在臨床真菌耐藥性日趨普遍、耐藥程度日趨嚴重的情況下，使抗真菌藥物恢復對耐藥真菌的作用，還可降低抗真菌藥物的用藥劑量，從而為患者節省了醫療費用，減少藥物的毒副作用。

附圖說明

圖1為不同濃度的連翹酯苷與氟康唑合用時，治療深部耐藥白念珠菌感染小鼠的腎臟活菌數SDA平板圖。

具體實施方式

下面結合實施例和附圖，對本發明作詳細描述。

實施例1.連翹酯苷和氟康唑聯用對不同臨床真菌株的作用

材料和方法

1.試藥：

連翹酯苷：上海融禾制藥科技有限公司，批號090923。

氟康唑注射液：輝瑞制藥有限公司，批號9167802。

二甲亞砜：上海世儀生物科技有限公司。

連翹酯苷用二甲亞砜配成溶液濃度為6.4mg/ml。

各試藥置于-20℃保存。實驗前，將藥物取出置于35℃溫箱融化，充分混勻，分別進行藥效學檢驗。

2.菌株：

臨床株：1)耐藥白念珠菌，分103、904、18、38和0710448五株；2)熱帶念珠菌，分409、936、422、0710453和0710087五株；3)新生隱球菌，分34880和32609兩珠。均由上海長海醫院真菌室提供，分別采自長海醫院不同科室臨床樣本，并經形態學和生化學鑒定。

所有實驗用菌株均于沙堡葡萄糖瓊脂培養基(SDA)劃板活化，白念珠菌、熱帶念珠菌和新生隱球菌等球狀菌于30℃培養2周后，分別挑取單克隆再次劃板活化，取第二次所得單克隆置SDA斜面，用上述方法培養后于4℃保存備用。

3.培養液：

1)RPMI?1640液體培養液：

RPMI1640(Gibco?BRL)10g，NaHCO₃2.0g，嗎啡啉丙磺酸(Sigma)34.5g(0.165M)，加三蒸水900ml溶解，1N?NaOH調pH至7.0(25℃)，三蒸水定容至1000ml，0.22μm微孔濾膜過濾除菌，分裝后于4℃保存備用。

2)沙堡葡萄糖瓊脂固體培養基(SDA)：

蛋白胨10g，葡萄糖40g，瓊脂18g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，調整pH至7.0，以三蒸水定容至1000ml，高壓滅菌(121℃，15min)后于4℃保存備用。

3)YEPD培養液：

酵母浸膏10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，三蒸水定容至1000ml，高壓滅菌(121℃，15min)后于4℃保存備用。

4.儀器設備：

Multiskan?MK3型酶標檢測儀(芬蘭Labsystems產品)

隔水式電熱恒溫培養箱(上海躍進醫療器械廠)

THZ-82A臺式恒溫振蕩器(上海躍進醫療器械廠)

SW-CT-IF型超凈化工作臺(蘇州安泰空氣技術有限公司)

5.菌液制備：

實驗前，用接種圈從4℃保存的SDA培養基上分別挑取白念珠菌、熱帶念珠菌和新生隱球菌各球狀菌少量，分別接種至1ml?YEPD培養液，于30℃，200rpm振蕩培養，活化16h，使真菌處于指數生長期后期。然后將各菌液分別加至1mlYEPD培養液中，用上述方法再次活化，培養16h，用血細胞計數板計數，以RPMI?1640培養液分別調整各菌液濃度至1×10³～5×10³CFU/ml。

6.藥敏板制備：