[發(fā)明專(zhuān)利]鑒別內(nèi)源性和外源性禽白血病病毒的三重PCR試劑盒

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010153921.3
• 申請(qǐng)日: 2010-04-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101824489A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韓凌霞;司昌德;周剛
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/70
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/70;C12Q1/68
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;余光軍

1.一種能同時(shí)鑒別內(nèi)源性和外源性禽白血病病毒的三重PCR試劑 盒，包括：DNA聚合酶，dNTP，引物，PCR緩沖液，雙蒸水；其特征在于： 所述的引物由3對(duì)引物組成，其中，第1對(duì)引物的序列為SEQ?ID?NO：1和SEQ ID?NO：2所示，第2對(duì)引物的序列為SEQ?ID?NO：3和SEQ?ID?NO：4所示，第3 對(duì)引物的序列為SEQ?ID?NO：5和SEQ?ID?NO：6所示。

2.按照權(quán)利要求1所述的三重PCR試劑盒，其特征在于：還包括有 陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒1、陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒2、陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒3和1個(gè)陰性對(duì)照；其 中，所述的陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒1的制備方法包括：(1)以禽白血病病毒RAV-1 株的cDNA為模板，以SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2為引物進(jìn)行PCR擴(kuò) 增，得到793bp的擴(kuò)增產(chǎn)物，將擴(kuò)增產(chǎn)物回收并純化后克隆至pMD18-T 載體，即得；

所述的陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒2的制備方法包括：以禽白血病病毒RAV-1株 的cDNA為模板，以SEQ?ID?NO：3和SEQ?ID?NO：4為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增， 得到387bp的擴(kuò)增產(chǎn)物，將擴(kuò)增產(chǎn)物回收并純化后克隆至pMD18-T載體， 得到陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒2；

所述的陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒3的制備方法包括：以感染內(nèi)源性ALV的雞胚 基因組DNA為模板，以SEQ?ID?NO：5和SEQ?ID?NO：6為引物進(jìn)行PCR擴(kuò) 增，得到234bp的擴(kuò)增產(chǎn)物，將擴(kuò)增產(chǎn)物回收并純化后克隆至pMD18-T 載體，得到陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒3。

3.按照權(quán)利要求1所述的三重PCR試劑盒，其特征在于：還包括空 白對(duì)照，所述的空白對(duì)照是蒸餾水。

4.按照權(quán)利要求1所述的三重PCR試劑盒，其特征在于：所述的 DNA聚合酶為rTaq?DNA聚合酶。