[發明專利]克隆鱗翅目昆蟲雄性基因組的方法

無效

• 申請號: 201010152921.1
• 申請日: 2010-04-12
• 公開（公告）號: CN101828542A
• 公開（公告）日: 2010-09-15
• 發明（設計）人: 徐世清;袁紅霞;司馬楊虎;甘麗萍;季明明
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: A01K67/033
• 分類號: A01K67/033
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 陶海鋒

1.一種克隆鱗翅目昆蟲雄性基因組的方法，包括以下步驟：

(1)根據所用受體昆蟲和供體昆蟲的生物學特性，在適宜生長發育溫度范圍內，調節飼養開始時間和飼養及保護溫度，促使供體昆蟲雌雄蛾在受體昆蟲雌蛾羽化前2日至羽化當日羽化；在受體昆蟲雌蛹羽化前的2d～3d接受輻射，破壞卵母細胞核；

(2)采用供體昆蟲雄蛾的精液對受體昆蟲處女蛾進行人工授精；

(3)選擇適合受體昆蟲生物學特性的產卵溫度和相對濕度，收集步驟(2)中人工授精處理后的雌蛾的產出卵；

(4)對步驟(3)所得產出卵進行雄核發育處理，獲得雄核發育昆蟲卵；

(5)按常規現有技術篩選和處理步驟(4)所得雄核發育昆蟲卵，選擇適合受體昆蟲生物學特性的卵孵化溫度、相對濕度和光照條件，進行孵化處理，實現對鱗翅目昆蟲雄性基因組的克隆，即獲得精子供體昆蟲的G1代雄性基因組克隆體。

2.根據權利要求1所述的克隆鱗翅目昆蟲雄性基因組的方法，其特征在于，采用步驟(2)中采用供體昆蟲雄蛾的精液對受體昆蟲處女蛾進行人工授精時，將步驟(2)中供體昆蟲雄蛾的精液用精子稀釋液調整至濃度為25～40萬尾/μL。

3.根據權利要求1所述的克隆鱗翅目昆蟲雄性基因組的方法，其特征在于，步驟(4)中所述雄核發育處理的方法為：步驟(3)中人工授精后所得產出卵，于25℃環境中經過熱處理60min～120min，用37℃～40℃熱處理220min～140min，獲得雄核發育昆蟲卵。

4.根據權利要求1所述的克隆鱗翅目昆蟲雄性基因組的方法，其特征在于，步驟(5)中所述受體昆蟲卵孵化處理的方法為：在20℃～30℃溫度范圍，70％～90％的相對濕度范圍，每日0h～24h光照時間范圍內，選擇適合受體昆蟲生物學特性的卵孵化溫度、相對濕度和光照條件，保護卵直至孵化。