[發(fā)明專利]在重組畢赤酵母中表達假黑盤菌素成熟多肽的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010149914.6 | 申請日： | 2010-04-16 |
| 公開（公告）號： | CN101845454A | 公開（公告）日： | 2010-09-29 |
| 發(fā)明（設計）人： | 劉德虎 | 申請（專利權）人： | 劉德虎 |
| 主分類號： | C12N15/81 | 分類號： | C12N15/81;C12N15/31;C12N1/19;C07K14/37;C07K1/16;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產(chǎn)權代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飛;王加嶺 |
| 地址： | 100081 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 重組 酵母 表達 盤菌 成熟 多肽 方法 | ||
技術領域
本發(fā)明涉及基因工程領域，具體地說，涉及一種在重組畢赤酵母中表達假黑盤菌素成熟多肽的方法。
背景技術
抗菌肽(antimicrobial?peptides，AMPs)是指一類由12～100個氨基酸組成，帶有凈正電荷，表現(xiàn)兩親性的且具有抗菌活性的小分子多肽的總稱。有關抗菌肽的研究已經(jīng)有50多年的歷史，迄今為止，已鑒定各種不同生物來源的抗菌肽約有880種(Brogden?K?A，2005)。抗菌肽由于其廣譜的抗菌活性(包括針對革蘭氏陽性細菌，革蘭氏陰性細菌、真菌、甚至某些病毒等)而日益受到人們的關注。特別是過去數(shù)十年中，由于抗生素的濫用而導致帶有抗生素抗性的致病菌株不斷出現(xiàn)，急需開發(fā)新型的抗菌藥物。抗菌肽因其存在著巨大的藥用潛力因而有望成為抗生素的替代品之一。因此，近年來有關抗菌肽的研究進展迅速，包括抗菌肽的純化、表征、基因克隆和重組表達、蛋白晶體結構的解析、結構與功能關系等研究領域，人們對抗菌肽的了解越來越廣泛和深入。
2003年，Mygind等人(Mygind?P?H.等，2005)首次報道從一種絲狀腐生真菌-假黑盤菌(Pseudoplectania?nigrella)中鑒定和純化出一種defensin家族的抗菌肽-假黑盤菌素(plectasin)，并解析了該多肽的三維結構(PDB?ID：1ZFU)。假黑盤菌素的氨基酸序列和結構分析表明，它具有哺乳動物抗菌肽defensins家族的特征，但它的二硫鍵排列方式又不同于任何一種亞家族，而與昆蟲來源的一些defensins相同。通過體外抑菌實驗，發(fā)現(xiàn)假黑盤菌素對多種常見的人類革蘭氏陽性病原細菌-包括對抗生素敏感型及其耐藥菌株都具有較強的抗菌能力(如表1所示)，而且其抑菌濃度與殺菌濃度并無多大差異。
表1假黑盤菌素可作用于多種革蘭氏陽性病原細菌
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