[發(fā)明專利]精氨酸發(fā)酵聯(lián)合酶轉(zhuǎn)化制備瓜氨酸的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010147697.7
• 申請(qǐng)日: 2010-04-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102220390A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李煒;李文濂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海聚瑞生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12P13/10
• 分類號(hào): C12P13/10;C12R1/15;C12R1/40
• 代理公司: 上海開(kāi)祺知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31114
• 代理人: 費(fèi)開(kāi)逵

1.一種精氨酸發(fā)酵聯(lián)合酶轉(zhuǎn)化制備瓜氨酸的方法，其特征在于，利用含有精氨酸脫亞氨基酶的菌液投入含有精氨酸的發(fā)酵液中，然后將發(fā)酵液中的精氨酸直接轉(zhuǎn)化為瓜氨酸，最后分離純化得到合格的瓜氨酸，具體包括以下步驟：

1)精氨酸發(fā)酵液的制備：利用本公司研發(fā)的精氨酸發(fā)酵菌種Ac189-20，微生物保藏號(hào)：CGMCC?No.3693，發(fā)酵產(chǎn)生精氨酸發(fā)酵液；

2)含精氨酸脫亞氨基酶的惡臭假單胞菌濕菌體的培養(yǎng)：利用本公司研發(fā)的菌種Ac88，微生物保藏號(hào)：CGMCC?No.3694，制備含精氨酸脫亞氨基酶的惡臭假單胞菌濕菌體；

3)精氨酸直接轉(zhuǎn)化瓜氨酸；

4)瓜氨酸產(chǎn)品的提純。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)的發(fā)酵條件為：pH?6.7～7.0，溶解氧20％～25％，流加補(bǔ)糖，發(fā)酵周期78小時(shí)，得到的發(fā)酵液中精氨酸含量為60～80g/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2)的培養(yǎng)條件為：pH?6.4，溶解氧5％～15％，發(fā)酵周期30小時(shí)，包括種子罐。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的制備方法，其特征在于，所述溶解氧以發(fā)酵前溶氧值為100％計(jì)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，將步驟2)得到的惡臭假單胞菌濕菌體按濕菌體對(duì)需要轉(zhuǎn)化的精氨酸發(fā)酵液1∶25～30體積比，投入步驟1)得到的含精氨酸的發(fā)酵液中，并加入總體積0.05wt％的十六烷基三甲基溴化銨作為催化劑進(jìn)行酶轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化條件為pH?5.5～6.5，溫度37℃，轉(zhuǎn)化周期24小時(shí)，即得到含有瓜氨酸的發(fā)酵液。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，將含有瓜氨酸的發(fā)酵液經(jīng)過(guò)濾除菌、洗脫、脫色、濃縮結(jié)晶，離心分離，即制得純品。