[發明專利]一種快速檢測豬細小病毒的環介導等溫擴增試劑盒

有效

• 申請號: 201010146356.8
• 申請日: 2010-04-14
• 公開（公告）號: CN101818212A
• 公開（公告）日: 2010-09-01
• 發明（設計）人: 崔尚金;陳長木
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;余光軍

1.一種快速檢測豬細小病毒的環介導等溫擴增試劑盒，包括：等溫反應緩沖液， DNA聚合酶，dNTP，硫酸鎂，由3對引物所組成的混合物，甜菜堿，蒸餾水和熒 光染料；其中，第1對引物序列為SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2所示，第2對引物 序列為SEQ?ID?NO：3和SEQ?ID?NO：4所示，第3對引物序列為SEQ?ID?NO：5和SEQ? ID?NO：6所示；

所述等溫反應緩沖液為10×等溫反應緩沖液，其中含有200mM三羚基甲基氨 基甲烷鹽酸鹽、100mM氯化鉀、100mM硫酸銨、20mM硫酸鎂和1％曲拉通。

2.按照權利要求1所述的環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于：所述3對引 物所組成的混合物是由各引物按照等摩爾的比例組成。

3.按照權利要求1所述的環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于：所述的DNA聚 合酶為Bst?DNA聚合酶，其規格優選為5U/ul。

4.按照權利要求1所述的環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于：所述的甜菜堿 為5M甜菜堿。

5.按照權利要求1所述的環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于：所述的硫酸鎂 為100mM硫酸鎂。

6.按照權利要求1所述的環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于：所述的dNTP為 10mM?dNTP。

7.按照權利要求1所述的環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于：所述的蒸餾水 為三蒸處理水。

8.按照權利要求1所述的環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于：所述的熒光染 料為1000×的熒光染料Gel-red。

9.按照權利要求1所述的環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于，所述等溫反應 緩沖液為10×等溫反應緩沖液，其體積大于或等于2.5ul；所述DNA聚合酶的規格 為5U/ul，其體積大于或等于1.0ul；所述dNTP濃度為10mM，其體積大于或等于 1.5ul；所述硫酸鎂為100mM硫酸鎂，其體積大于或等于1.5ul；所述內引物和外 引物的混合物的體積大于或等于2.0ul；所述甜菜堿為5M甜菜堿，其體積大于或等 于5.0ul；所述蒸餾水為三蒸處理水，其體積大于或等于6.5ul；所述熒光染料為1000× 的熒光染料Gel-red，其體積大于或等于1ul。