[發(fā)明專利]鑒定轉(zhuǎn)基因玉米中植酸酶基因表達(dá)框構(gòu)建的PCR方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010143835.4 | 申請日： | 2010-04-07 |
| 公開（公告）號： | CN101792811A | 公開（公告）日： | 2010-08-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 謝家建;孫爻;彭于發(fā) | 申請（專利權(quán)）人： | 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129 | 代理人： | 胡敬紅 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 鑒定 轉(zhuǎn)基因 玉米 中植酸酶 基因 表達(dá) 構(gòu)建 pcr 方法 | ||
1.鑒定轉(zhuǎn)基因玉米中植酸酶基因表達(dá)框構(gòu)建的PCR方法，其步驟如下：
(1)采用引物對A/B和C/D分別對待測品種的基因組進(jìn)行PCR擴增；
(2)凝膠電泳檢測兩對引物的PCR擴增產(chǎn)物，都出現(xiàn)目標(biāo)長度的檢測帶的品種為轉(zhuǎn)有Seq?ID No.1所示核苷酸序列的構(gòu)建載體的轉(zhuǎn)基因品種，
引物對A/B的正向引物A根據(jù)Seq?ID?No.1所示核苷酸序列1-649bp位置設(shè)計，反向引物B 根據(jù)Seq?ID?No.1所示核苷酸序列650-2134bp位置設(shè)計；
引物對C/D的正向引物C根據(jù)Seq?ID?No.1所示核苷酸序列650-2134bp位置設(shè)計，反向引 物D根據(jù)Seq?ID?No.1所示核苷酸序列2135-2814bp位置設(shè)計；
所述正向引物A為Phy-1F：5‘-CACCATCAGCAATGCACACC-3’
所述反向引物為BPhy-1R：5‘-CCGTATCGCAAGTGGACTGA-3’，擴增的片段為長度為 257bp；
所述正向引物C為Phy-2F：5‘-CGTGTCTTGGTTAATGATCG-3’，
所述反向引物D為Phy-2R：5‘-GGCAAATCACTCGGTGTATC-3’，擴增片段長度為296 bp。
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