[發明專利]霍亂滅活口服疫苗效力的測定方法及檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201010143367.0
• 申請日: 2010-03-10
• 公開（公告）號: CN101825577A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發明（設計）人: 李生迪;陳翠萍;朱衛華;宣俊文;王永謙
• 申請（專利權）人: 蘭州生物制品研究所
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31;G01N33/535
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 張晉

1.霍亂滅活口服疫苗效力的測定方法，其特征是分別從霍亂弧菌O1群菌株和O139型菌株提取脂多糖，以霍亂O1群和O139型的脂多糖為抗原，或者以抗O1LPS、O139LPS的兔抗體為抗體，采用間接酶聯吸附試驗半定量測定霍亂滅活口服疫苗中霍亂弧菌O1群和O139型的脂多糖含量，根據所測得的霍亂滅活口服疫苗中O1群和O139型的脂多糖含量確定疫苗的效力。

2.權利要求1所述的霍亂滅活口服疫苗效力的測定方法，其特征是以霍亂O1群和O139型的脂多糖為抗原，采用間接ELISA法測定霍亂滅活口服疫苗的效力指標。

3.權利要求1所述的霍亂滅活口服疫苗效力的測定方法，其特征是：

a.從霍亂弧菌中分離出霍亂弧菌O1群菌株和非O1群O139型菌株，再分別從所得到的O1群菌株和O139型菌株中提取O1群霍亂弧菌的脂多糖和0139型霍亂弧菌脂多糖，標化后將所得到的O1群霍亂弧菌脂多糖和0139型脂多糖分別用磷酸鹽緩沖液(PBS)稀釋，將霍亂O1?LPS參比品稀釋為10μg/ml、O139LPS稀釋為2.5μg/ml，再將稀釋后的O1脂多糖和O139脂多糖分別包被于固相載體上，每孔0.1ml，O1脂多糖和O139脂多糖各加一行。酶標板可以為聚苯乙烯或聚乙烯酶標板。

b.將被檢疫苗用PBS稀釋為5×10⁷菌/ml，每孔包被0.1ml，以上述O1脂多糖和0139脂多糖的包被孔為參照，，再在其中加入經稀釋的兔抗鼠IgG-HRP，即按常規間接ELISA法進行操作，最后加入顯色底物，37℃放置5-7分鐘，加入2M硫酸終止反應，測定OD₄₅₀的吸光值，根據LPS參照孔和疫苗試驗孔的OD₄₅₀數值進行對比，得以判斷被檢疫苗的效力。

4.用于進行權利要求2或3所述的方法進行霍亂滅活口服疫苗效力的測定方法的檢測試劑盒，

其檢測試劑盒是由以下內容組成：

a.孔酶標板

b.霍亂弧菌O1群菌株和O139型菌株脂多糖

c.酶標抗抗體

d.底物A

e.底物B

f.酶標洗液

g.終止液。